Rezultatele studiului german privind boala renală cronică (GCKD) sprijină Asociația de lungime relativă a telomerelor cu mortalitate într-o cohortă mare de pacienți cu boală cronică moderată de rinichi
Mar 12, 2022
Contact: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Federica Fazzini1, Claudia Lamina1, Julia Raschenberger & et al.
Kidney International (2020) 98, 488–497; https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.02.034
Drepturi de autor ª 2020, Societatea Internațională de Nefrologie. Publicat de Elsevier Inc. Acesta este un articol cu acces deschis sub licență CC BY
Se știe că lungimea telomerelor este invers asociată cu îmbătrânirea și a fost propusă ca un marker pentru bolile legate de îmbătrânire. Uzura telomerilor poate fi accelerată de stresul oxidativ și inflamația, ambele prezente în mod obișnuit la pacienții cu boală cronică de rinichi. Aici, am investigat dacă lungimea relativă a telomerilor este asociată cu mortalitatea într-o cohortă mare de pacienți cu boală renală cronică în stadiul G3 și A1-3 sau G1-2 cu proteinurie evidentă (A3) la înscriere. Lungimea relativă a telomerilor a fost cuantificată în sângele periferic printr-o metodă cantitativă PCR la 4.955 de pacienți din studiul GCKD, o cohortă observațională prospectivă în desfășurare. Urmărirea completă de patru ani a fost disponibilă de la 4.926 de pacienți la care am înregistrat 354 de decese. Lungimea relativă a telomerilor a fost un predictor puternic și independent al mortalității de toate cauzele. Fiecare scădere de 0,1 unitate de lungime relativă a telomerilor a fost puternic asociată cu un risc de deces crescut cu 14% (raportul de risc 1,14 [interval de încredere 95% 1.06-1.22]) într-un model ajustat pentru vârstă, sex, RFGe inițial, raportul albumină/creatinină în urină, diabet zaharat, boli cardiovasculare predominante, colesterol LDL, colesterol HDL, fumat, indice de masă corporală, tensiune arterială sistolică și diastolică, proteină C reactivă și albumină serică. Acest lucru s-a tradus într-un risc cu 75 la sută mai mare pentru cei din cea mai mică, comparativ cu cea mai mare cuartilă de lungime relativă a telomerilor. Asocierea a fost determinată în principal de 117 decese cardiovasculare (1,20 [1.05-1,35]), precum și de 67 de decese din cauza infecțiilor (1,27 [1.{07-1,50]). Astfel, descoperirile noastre susțin o asociere a lungimii mai scurte a telomerilor cu mortalitatea de orice cauză, mortalitatea cardiovasculară și decesul datorat infecțiilor la pacienții cu boală renală cronică moderată.
CUVINTE CHEIE:boală cronică de rinichi; infecții; mortalitate; lungimea relativă a telomerilor
Boala cronică de rinichi(CKD) este o boală complexă, iar ereditabilitatea sa a fost estimată la 30 la sută – 70 la sută .9–12 În ultimii ani, studiile de asociere la nivelul genomului au identificat mulți loci genetici asociați cu funcția renală și CKD.13–17.
Cu toate acestea, polimorfismele cu un singur nucleotide index la locațiile identificate explică doar o parte minoră a eredității și ar putea lipsi factori genetici suplimentari. Până în prezent, doar câteva studii mici au investigat asocierea dintre TL și boala de rinichi. Unele studii au constatat că TL scurtă se corelează cu funcția renală afectată în populația generală,18,19, precum și la pacienții cu insuficiență cardiacă.20 Recent am descris TL relativ mai scurt (RTL) semnificativ mai scurt la pacienții cu BRC moderat severă care au boli cardiovasculare prevalente ( BCV),21 precum și o asociere cu durata22 și progresia CKD.23 Pacienții care au ajuns la insuficiență renală tratați prin hemodializă sunt descriși ca având TL redus în comparație cu martorii sănătoși24–27, iar TL redus este invers asociat cu mortalitatea. 28 Doar câteva investigații au fost efectuate la pacienții renali nedependenți de dializă.21–23,29,30 Din cunoștințele noastre, studiul actual este primul studiu prospectiv care investighează asocierea dintre RTL leucocitar și cauzele de mortalitate într-un larg. cohorta CKD nedependentă de dializă.
Beneficiu Cistanche: îmbunătățirea funcției renale
REZULTATE
Caracteristicile inițiale ale populației studiate
RTL a fost cuantificat în sângele periferic printr-o metodă cantitativă de reacție în lanț a polimerazei la 4955 de pacienți din Germania.Boală cronică de rinichistudiu. O urmărire completă de {{0}}an a fost disponibilă de la 4926 de pacienți. Caracteristicile inițiale ale acestor 4926 de pacienți în conformitate cu quartilele RTL sunt prezentate în Tabelul 1. RTL a variat de la un minim de {{10}}.4{0 la un maxim de 2,31 (Figura suplimentară S1 ), cu o medie ± SD de 0,95 ±0,19 și o mediană de 0,92 (1-a quartila ¼ 0,82; a 3-a quartila ¼ 1 .05). RTL a fost corelat negativ cu vârsta (r ¼ – {{30}}.36, P < 0,001)="" și="" corelat="" pozitiv="" cu="" rata="" de="" filtrare="" glomerulară="" estimată="" (egfr;="" r="" ¼="" 0,17,="" p="">< 0,001)="" și="" albumina="" urinară="" –="" raportul="" creatininei="" (r="" ¼="" 0,05,="" p="">< 0,001).="" când="" am="" ajustat="" rtl="" pentru="" vârstă="" și="" sex,="" nu="" am="" mai="" observat="" o="" corelație="" semnificativă="" cu="" egfr="" și="" raportul="" albumină-creatinină="" în="">
Urmărire prospectivă și mortalitate
Un total de 354 de decese au avut loc pe o perioadă mediană de urmărire de 4 ani (1483 de zile). Cauzele decesului au fost BCV inclusiv infarct miocardic, boală coronariană, moarte subită cardiacă, insuficiență cardiacă congestivă, embolie pulmonară, valvulopatie cardiacă și accident vascular cerebral ischemic (117 pacienți, 33,1 la sută), infecții (67 pacienți, 18,9 la sută), vascular cerebral neischemic. cauze (9 pacienți, 2,5 la sută), boli vasculare periferice (7 pacienți, 2,0 la sută), insuficiență renală (8 pacienți, 2,3 la sută), diverse alte cauze (103 pacienți, 29,1 la sută) și cauze necunoscute ( 43 de pacienți, 12,1 la sută).
Graficele de incidență cumulativă arată că incidența mortalității de toate cauzele (Figura 1a) crește cu RTL mai scurt, cu cea mai mare incidență cu cel mai mic quartila RTL. În curbele funcției de incidență cumulativă a mortalității cardiovasculare (Figura 1b) și a mortalității infecțioase (Figura 1c), diferența dintre cuartile a fost mai puțin pronunțată, dar ordinea quartilelor a fost aceeași.
Figura 1|Funcția de incidență cumulativă pentru (a) mortalitatea de toate cauzele, (b) mortalitatea prin boli cardiovasculare (CVD) și (c) decesul datorat infecțiilor, pe quartile (Q) de lungime relativă a telomerilor (RTL). Q1 este quartila incluzând pacienții cu cel mai scurt RTL.
Rezultatele modelelor de regresie Cox care aplică diferite ajustări sunt furnizate în Tabelul 2 și au arătat o asociere semnificativă între RTL mai scurt și riscul de mortalitate de toate cauzele. Evaluată continuu, fiecare scădere de 0.1 unități RTL a fost asociată cu un risc de deces crescut cu 16% într-un model ajustat pentru vârstă și sex (raportul de risc [HR], 1,16; interval de încredere [CI] de 95%), 1.08–1,24; P ¼ 1,7e-05). Asocierea a rămas semnificativă după o ajustare extinsă pentru eGFR, raportul albumină-creatinină în urină, diabetul zaharat și bolile cardiovasculare prevalente (modelul 2: HR, 1,16; 95% CI, 1,08-1,24), precum și factorii suplimentari de risc cardiovascular cu densitate scăzută. colesterol lipoprotein, colesterol lipoproteic cu densitate mare, fumat, indice de masă corporală, tensiune arterială sistolică, tensiune arterială diastolică, proteină C reactivă și albumină serică la momentul inițial (modelul 3: HR, 1,14; IC 95 la sută, 1,06-1,22; P ¼ 3,5e-04). Analizele neliniare P spline sunt prezentate în Figura 2 și au evidențiat o asociere aproape liniară a RTL cu mortalitatea de toate cauzele. Pacienții cu cel mai scurt RTL (prima cuartilă) au avut un risc cu 75% mai mare de mortalitate de orice cauză, comparativ cu cei din quartila cu cel mai lung RTL (Tabelul suplimentar S1, model complet ajustat: HR, 1,75; 95% CI, 1,22–2,50) P=0,0024).
În continuare, am analizat ceea ce determină asocierea RTL cu mortalitatea de orice cauză (Tabelul 2). Am evaluat cele mai frecvente 2 cauze specifice de deces și am observat că fiecare scădere de 0,1 unități RTL a fost asociată cu un risc crescut cu 20 procente de deces prin CVD în modelul complet ajustat (HR, 1,2 0; IC 95 la sută, 1.05–1,35; P=0,0052). RTL redus a fost, de asemenea, semnificativ invers asociat cu moartea din cauza infecțiilor. Fiecare scădere de 0,1 unități a RTL a fost asociată cu un risc de deces de 1,27-ori mai mare din cauza infecțiilor (HR, 1,27; 95% CI, 1,07–1,50; P=0,0051). Analizând estimările pentru diferitele cuartile din tabelul suplimentar S1, a evidențiat pentru decesul din cauza infecțiilor că estimările pentru fiecare dintre quartilele 1, 2 și 3 au fost la fel de ridicate în comparație cu cele pentru quartilele 4. Analiza cu alte cauze de deces ca precum și cauzele necunoscute de deces a fost evident prea eterogene și nu a evidențiat nicio asociere cu RTL (datele nu sunt afișate).
Graficul reziduurilor Schoenfeld scalate și testul privind ipotezele de pericol proporțional nu au sugerat efecte variabile în timp pentru RTL asupra niciunuia dintre rezultatele investigate. Subdistribuția HR atât pentru decesul cardiovascular, cât și pentru decesul cauzat de infecție, raportate în tabelul suplimentar S2, sunt doar ușor atenuate în comparație cu HR-urile specifice cauzei.
We also evaluated whether the effect of RTL on the 3 different outcomes differed between men and women and for patients with and without diabetes mellitus, but we did not detect a significant interaction for these variables, or for age (all P values of interaction >0.1 în modelele complet ajustate). Având în vedere că recent am observat o asociere în formă de U între durata CKD și RTL22, am efectuat o analiză de sensibilitate ajustând suplimentar pentru durata CKD la momentul inițial definită ca mai puțin de 6 luni, între 6 luni și 5 ani și mai mult de 5 ani. ani. Această ajustare suplimentară a dus la modificări doar marginale ale HR-urilor obținute pentru toate cele 3 efecte (Tabelul suplimentar S3).
Beneficiu Cistanche: îmbunătățirea funcției renale
DISCUŢIE
Rezultatele acestui studiu au arătat o asociere semnificativă a RTL cu mortalitatea de toate cauzele într-o cohortă de CKD nedependentă de dializă. RTL mai scurt a fost asociat cu un risc mai mare de mortalitate independent de funcția renală și de factorii tradiționali de risc cardiovascular. Această asociere a fost determinată de decesul din cauza BCV, precum și de decesul din cauza infecțiilor.
Asociere cu mortalitatea de orice cauză
Studii anterioare,5,6,31–35cu putine exceptii,36,37 au demonstrat o asociere negativă între RTL și mortalitatea de orice cauză în populația generală. Cel mai mare studiu de până acum (n ¼ 64.637) a fost efectuat de Rode și colab., cu un HR ajustat pentru mortalitate de 1,40 pentru decilul cu cel mai scurt față de decilul cu cel mai lung RTL.35În conformitate cu aceste rezultate, studiul nostru a arătat, cu fiecare scădere de 0.1 unități RTL, un risc cu 14% mai mare de mortalitate de orice cauză, ceea ce se traduce printr-un risc cu 75% mai mare pentru cei din cele mai scăzute, comparativ cu cele mai mari. quartila de RTL. Din cunoștințele noastre, numai Carrero și colab.28au investigat relația dintre RTL și riscul de mortalitate la pacienții cu BRC. Ei au studiat 175 de pacienți cu boală renală în stadiu terminal tratați prin hemodializă, dintre care 70 au murit în timpul unei perioade mediane de 31 de luni de observație. Autorii au observat că TL a prezis în mod independent supraviețuirea pacientului după o ajustare suplimentară pentru vârstă, sex și inflamație. Studiul actual extinde aceste observații la un grup mult mai mare de persoane cu BRC care nu necesită dializă.
Figura 2|Spline neliniare ajustate (și benzi de încredere de 95 la sută) pentru asocierea dintre creșterea lungimii relative a telomerilor (RTL) și raportul de risc (HR) a (a) mortalității de toate cauzele, (b) decesului cardiovascular și (c) decesului din cauza infecțiilor . HR este dat ca log-scale pe taxe. Grayline: model de ajustare 1 (ajustat pentru vârstă și sex). Blueline: model de ajustare 3 (ajustat pentru vârstă, sex, estimat [continuare]
Asociere cu mortalitatea prin BCV
Niciun studiu nu a investigat până acum asocierea RTL cu mortalitatea prin BCV la pacienții cu BRC, deși aceasta este cauza majoră de deces la acești pacienți. În funcție de etnia investigată și de modelele de ajustare a datelor, unele studii, dar nu toate, în populația generală au raportat o asociere între RTL scăzut și rezultatele BCV.33,38–41Sprijin puternic pentru o asociere cauzală a venit dintr-un studiu de randomizare mendelian în care s-a constatat că variantele genetice asociate cu RTL mai scurte sunt asociate cu boala cardiacă ischemică.40În studiul de față, am identificat o asociere semnificativă a RTL cu decesele cardiovasculare, cu un risc cu 20 la sută mai mare cu fiecare scădere a RTL cu 0,1 unități sau un risc cu 75% mai mare pentru aceștia. pacienții din quartila cu cel mai scurt TL comparativ cu quartila cu cel mai lung TL. Această constatare este în concordanță cu raportul nostru anterior al unei asocieri cu evenimente cardiovasculare prevalente la această populație de pacienți: fiecare scădere a RTL cu 0,1 unități a fost asociată în mod semnificativ cu o șansă cu 6% mai mare pentru BCV prevalentă într-un model care ajustează pentru vârstă, sex, curent. fumat, hipertensiune arterială, starea diabetului zaharat, colesterol cu lipoproteine cu densitate scăzută, cu densitate mare
colesterolul lipoproteinelor, proteina C reactivă, eGFR și indicele de masă corporală.21Urmărirea prospectivă la acești pacienți din prezenta investigație a arătat că în special cea mai mică cuartilă a RTL a fost asociată cu un risc semnificativ crescut, în timp ce celelalte 3 cuartile au prezentat estimări foarte similare (Figura 1b).
Asociere cu decesul din cauza infecțiilor
Deși dovezile experimentale susțin rolul senescenței celulare și al TL scurt în răspunsul imun afectat, studiile epidemiologice sunt rare, în special la pacienții cu BRC. Helby și colab. a efectuat cel mai mare studiu prospectiv bazat pe populație (n ¼ 75.309) care investighează RTL și riscul de spitalizare pentru boli infecțioase și riscul de deces legat de infecție. Pe parcursul a 7 ani de urmărire, ei au observat un risc mai mare de orice infecții în quartila cu cel mai scurt, comparativ cu quartila cu cel mai lung RTL.42 Studiile anterioare cu eșantion de dimensiuni mai mici au raportat rezultate contradictorii.32,43,44Descoperirile noastre la pacienții cu BRC descriu pentru prima dată asocierea dintre RTL scurt și riscul mai mare de deces din cauza infecțiilor în această populație cu risc ridicat.
Beneficiu Cistanche: îmbunătățirea funcției renale
Mecanism potențial
Mecanismul biologic care stă la baza relației dintre RTL și mortalitate este încă neclar. Asocierea identificată de studiul nostru nu elucidează dacă scurtarea RTL este legată cauzal de bolile cardiovasculare și infecții. Cu toate acestea, un studiu de asociere la nivelul genomului, urmat de o analiză a scorului de risc genetic care combină variantele de plumb la 7 loci genetici, a arătat o asociere a alelelor asociate cu RTL mai scurt cu risc crescut de boală coronariană. Această constatare oferă un posibil sprijin pentru un potențial rol cauzal al RTL în BCV.45,46În plus, senescența celulară indusă de uzura telomerilor ar putea fi un declanșator al aterosclerozei, precum și al arteriosclerozei. Acumularea de celule senescente în vas contribuie la formarea plăcii aterosclerotice și la calcificări medii, rezultând în creșterea rigidității arteriale ca o caracteristică dominantă a bolii arteriale uremice.47Cele mai multe dintre studii au măsurat RTL în ADN-ul din leucocitele periferice. Cu toate acestea, s-a demonstrat o corelație strânsă între leucocite și țesutul peretelui aortic TL.48Prin urmare, senescența celulară ar putea afecta celulele endoteliale ducând la disfuncția peretelui vascular și promovând aderența celulelor imune, un eveniment primar în ateroscleroză. În plus, telomerii scurti activează p53 și autofagia în celulele progenitoare cardiace, destabilizand echilibrul de repaus și proliferare către diferențiere și senescență, ducând la o epuizare a celulelor progenitoare cardiace.49S-a demonstrat că disfuncția telomerilor induce o reprimare profundă dependentă de p53-a regulatorilor principali ai biogenezei și funcției mitocondriale, ceea ce duce la compromis bioenergetic din cauza fosforilării oxidative afectate și a generării de adenozin trifosfat.50,51
Există, de asemenea, mai multe legături între RTL și infecții. Pierderea telomerilor a fost observată în timpul diferențierii celulelor T,52în infecții virale cronice,53si cu varsta.54Mai mult, TL leucocitar scurt a fost raportat ca un factor de risc în diferite boli legate de sistemul imunitar.55si diabet.56TL mai scurtă a leucocitelor determină senescența celulară, care este urmată de o reducere a capacității de proliferare a celulelor imune. TL poate fi, de asemenea, implicat în scăderile legate de vârstă ale funcției imune legate de răspunsul insuficient la vaccinuri și infecții acute.57–59Un rol potențial al TL în infecții este susținut și de un studiu recent de asociere la nivelul întregului genom într-o populație chineză. Dorjee și colegii săi au observat o asociere între o alelă care reduce TL și moartea din cauza infecției respiratorii.60Uzura RTL ar putea fi puternic declanșată de prezența stresului oxidativ crescut, o afecțiune comună în CKD.61 Mai multe studii in vitro și in vivo au arătat că stresul oxidativ accelerează uzura telomerilor.62,63Într-adevăr, telomerii, cu conținutul lor ridicat de guanină, sunt foarte sensibili la daune oxidative,64iar rupturile ADN-ului monocatenar induse de stresul oxidativ ar putea fi un factor important pentru scurtarea telomerilor în timpul replicării ADN-ului.65
Beneficiu Cistanche: îmbunătățirea funcției renale
Puncte forte și limitări
Punctele forte ale acestei investigații includ dimensiunea mare a eșantionului dintr-o populație bine definită, cu o urmărire mediană de 4 ani, aproape fără pierderi de urmărire, omogenitatea populației studiate și o evaluare centralizată a TL și a măsurilor de rezultat. Măsurarea RTL în special este de cea mai mare importanță deoarece standardizarea între laboratoare nu este ușor de realizat și, prin urmare, procesul ar trebui efectuat în același laborator în exact aceleași condiții în ceea ce privește protocolul, gena de referință, instrumentul, personalul66 și ADN. procedura de extracție.67
Există unele limitări ale acestui studiu. Mai întâi, RTL a fost măsurat în leucocite periferice. Se știe că rata de progresie spre senescență diferă între subseturile de limfocite. 59Din păcate, nu au fost disponibile date despre compoziția tipului de celule sanguine în limba germanăBoală cronică de rinichistudiu și, prin urmare, nu a fost posibilă investigarea acestui aspect. Cunoașterea RTL din diferite tipuri de celule renale ar fi de interes, dar nu este posibil să se obțină într-un studiu epidemiologic amplu, deoarece acest lucru ar necesita material de țesut din biopsii. A doua limitare include designul observațional al studiului, care nu permite clarificarea cauzalității sau a mecanismului biologic. În al treilea rând, studiul a recrutat în principal pacienți cu BRC în stadiul G3 sau A3, iar concluziile ar putea să nu fie generalizabile la alte stadii ale BRC. În al patrulea rând, asocierea cu cauze specifice de deces ar fi putut fi limitată de puterea statistică, dar a fost încă prezentă pentru cele 2 cauze principale specifice de deces. În cele din urmă, deși analizele noastre au fost ajustate pentru factorii tradiționali de risc cardiovascular, precum și pentru parametrii funcției renale, nu putem exclude posibilitatea confuziei reziduale prin necunoscute sau nemăsurate.
variabile. Cu toate acestea, a fost foarte interesant de observat că estimările ajustate în funcție de vârstă și sex ale RTL pentru diferite rezultate au fost foarte stabile, cu ajustări suplimentare pentru celelalte variabile, indicând faptul că RTL este relativ independentă de alte variabile atunci când datele sunt ajustate pentru vârstă și sex.
Concluzii
TL relativ scurt cuantificat din leucocitele din sângele periferic a fost asociat în mod independent cu mortalitatea de orice cauză pe parcursul a 4 ani de urmărire la pacienții cu CKD moderat severă. Această asociere a fost determinată de decesul din cauza BCV, precum și de decesul din cauza infecțiilor.
Beneficiu Cistanche: îmbunătățirea funcției renale
METODE
Populația de studiu
GermanulBoală cronică de rinichi study is an ongoing prospective multicenter observational cohort. A detailed description of the study has been published previously.68 Briefly, 5217 patients under regular care by nephrologists were enrolled. Inclusion criteria were moderately reduced kidney function defined as eGFR of 30–60 ml/min per 1.73 m2 (stage G3, A1–A3) or an eGFR >60 ml/min la 1,73 m2 în prezența proteinuriei manifeste (stadiul G1–G2, A3). Criteriile de excludere au fost etnia non-caucaziană, transplantul de organe solide sau de măduvă osoasă, malignitatea activă cu 24 de luni înainte de screening, insuficiența cardiacă în stadiul IV al Asociației Inimii din New York și participarea legală sau incapacitatea de a oferi consimțământul. Parametrii de laborator prezentați au fost măsurați cu toții din probele biologice colectate într-un laborator central, așa cum s-a descris anterior.68 Informațiile despre factorii socio-demografici, istoricul medical și familial, medicamentele și calitatea vieții legate de sănătate au fost obținute de personal instruit prin chestionare standardizate. Boala cardiovasculară prevalentă la momentul inițial a fost definită ca antecedente de infarct miocardic non-fatal, bypass coronarian, angioplastie coronariană transluminală percutanată, accident vascular cerebral și intervenții la nivelul arterelor carotide (endorterectomie carotidiană și/sau angioplastie cu balon carotidian sau implantare de stent).
Toți participanții au furnizat consimțământul informat în scris, iar studiul a fost aprobat de comitetele de etică ale tuturor instituțiilor participante și înregistrat în registrul național pentru studii clinice (DRKS 00003971). Toate metodele au fost efectuate în conformitate cu liniile directoare aprobate și cu Declarația de la Helsinki. Datele sunt colectate și gestionate folosind Askimed (https://www.askimed.com) ca platformă web bazată pe cloud pentru colectarea și gestionarea formularelor de raportare de caz și a datelor de laborator.
Obiective clinice în timpul urmăririi prospective
După cum s-a descris recent, 69 de pacienți sunt urmăriți anual de personal instruit, alternând vizitele față în față cu vizitele telefonice. În timpul acestor vizite, datele privind spitalizările, evenimentele de rezultat și istoricul medical sunt actualizate ca parte a unui interviu structurat. Orice rapoarte de externare sunt colectate de la medicii curători și/sau spitale. Punctele finale sunt extrase continuu din aceste rapoarte de un comitet de efecte instruit și supravegheat, compus din 3 medici independenți, conform unui catalog de efecte prespecificat. Informațiile privind cauza decesului sunt preluate din aceste rapoarte, precum și din certificatele de deces colectate de la oficiile stării civile ori de câte ori personalul de studiu este informat despre decesul unui participant la studiu.
Analiza actuală include toate punctele finale care au avut loc până la următorul 4-an. Dacă un pacient a ratat vizita de urmărire de 4-an, am inclus toate obiectivele până la 4,5 ani după vizita de referință respectivă. Prin urmare, timpul de cenzură a fost fie data de 4-an de urmărire, fie 4,5 ani după momentul inițial. Rezultatul principal a fost mortalitatea de toate cauzele. Pentru a evalua dacă asociațiile identificate ar putea fi atribuite unei cauze specifice de deces, decesul din cauze cardiovasculare și bolile infecțioase au fost considerate rezultate secundare. Grupul deceselor cardiovasculare a inclus infarctul miocardic, boala coronariană, moartea subită cardiacă, insuficiența cardiacă congestivă, embolia pulmonară, boala valvulară cardiacă și accidentul vascular cerebral ischemic. Au fost înregistrate și alte cauze de deces, dar aceste subgrupuri nu au fost suficient de mari pentru a efectua analize suplimentare specifice cauzei.
Măsurarea RTL
ADN-ul genomic a fost extras din sânge integral într-un laborator central cu Modulul I de separare magnetică chimică (PerkinElmer chromagen Technologie GmbH, Baesweiler, Germania). Analiza actuală s-a bazat pe 4926 de pacienți pentru care au fost disponibile măsurători ale RTL în probele de sânge de bază și date despre mortalitate. RTL a fost măsurat în cvadruplicat utilizând un test cantitativ bazat pe reacția în lanț a polimerazei dezvoltat de Cawthon70 și modificat așa cum s-a descris anterior. 71 de probe de ADN au fost efectuate în reacții de 15-ml care conțineau 1x amestec principal Quantifast TM SYBR Green PCR (Qiagen, Hilden, Germania), 10 ng de ADN, 1 mM de primer telomer sau 250 nm de primer 36B4 al genei de întreținere. Am determinat raportul relativ dintre numărul de copii repetate ale telomerilor (T) și numărul de copii ale genei cu o singură copie (gena 36B4, care codifică fosfoproteina ribozomală PO, situată pe cromozomul 12; S). Rapoartele T/S sunt proporționale cu RTL individual. Automatizarea acestei proceduri cu randament ridicat a dus la măsuri foarte bune de control al calității cu un coeficient de variație inter-testare scăzut al rapoartelor T/S. Un ADN disponibil comercial inclus în toate plăcile cantitative de reacție în lanț a polimerazei a fost utilizat pentru a verifica performanța testului pe parcursul întregului studiu. Coeficientul de variație intertestare a rapoartelor T/S ale acestei probe analizate în 112 experimente independente a fost de 9,6% înainte de normalizare și a scăzut la 4,0% după normalizare (Figura suplimentară S2).
analize statistice
Am comparat caracteristicile inițiale ale participanților (Tabelul 1) utilizând testul Kruskal-Wallis pentru variabilele continue și testele chi-pătrat pentru variabilele categoriale. Curbele funcției de incidență cumulativă au fost utilizate pentru a estima incidența cumulativă a diferitelor cauze de deces care țin cont de riscul concurent.72 Au fost efectuate modele de regresie a hazardelor proporționale Cox pentru a evalua asocierile RTL cu 3 rezultate: (i) mortalitatea de toate cauzele, ( ii) deces din cauza BCV și (iii) deces din cauza infecțiilor. Pentru ambele obiective specifice cauzei (ii și iii), pacienții au fost cenzurați, dacă decesul a survenit din orice altă cauză. În plus, asocierile cu aceste obiective specifice cauzei au fost examinate utilizând regresia de supraviețuire a riscurilor concurente, considerând toate decesele din alte cauze ca evenimente concurente. Prin urmare, atât HR-urile specifice cauzei, cât și HR-urile subdiviziunii sunt raportate pentru deces din cauza BCV sau infecții. Modelele de riscuri proporționale Cox au fost ajustate folosind 3 niveluri diferite de ajustare: modelul 1 ajustat pentru vârstă și sex; modelul 2 ajustat suplimentar pentru eGFR inițial, raportul albumină-creatinină în urină, BCV prevalentă și diabet; Modelul 3 s-a ajustat în continuare pentru factorii tradiționali de risc de BCV: colesterolul cu lipoproteine cu densitate scăzută, colesterolul cu lipoproteine cu densitate mare, indicele de masă corporală, fumatul, tensiunea arterială sistolică și diastolică, proteina C reactivă și albumina. Selecția variabilelor ajustate pentru diferitele modele sa bazat pe diferențele de caracteristici clinice dintre quartilele RTL prezentate în Tabelul 1. În modelele de regresie, RTL a fost analizat continuu și ca predictor categoric (în cuartile de RTL). Având în vedere că rezultatele inițiale au indicat un risc mai mare, în special pentru valorile scăzute ale RTL, HR (specifică cauzei) este raportată și pentru quartilele 1, 2 și 3 în comparație cu quartila 4 ca referință (Tabelul suplimentar S1). Analiza ulterioară în aval s-a bazat pe inspecția vizuală a P-spline pentru a deriva forma relației dintre RTL și riscul de mortalitate. Am folosit coeficientul de corelare a rangului lui Spearman pentru a evalua asocierea dintre variabilele de studiu. Toate analizele statistice au fost efectuate folosind R 3.3.2 (https://www.r-project.org); valorile P<0.05 were="" considered="" statistically="">
REFERINȚE
1. Moyzis RK, Buckingham JM, Cram LS, et al. O secvență de ADN repetitivă foarte conservată, (TTAGGG)(n), prezentă la telomerii cromozomilor umani. Proc Natl Acad Sci US A. 1988;85:6622–6626.
2. Baird DM. Dinamica telomerilor în celulele umane. Biochimie. 2008;90:116–121.
3. von Zglinicki T, Martin-Ruiz CM. Telomerii ca biomarkeri pentru îmbătrânire și boli legate de vârstă. Curr Mol Med. 2005;5:197–203.
4. Forero DA, González-Giraldo Y, López-Quintero C, et al. Lungimea telomerilor în boala Parkinson: o meta-analiză. Exp Gerontol. 2016;75:53–55.
5. Mons U, Müezzinler A, Schöttker B, et al. Lungimea telomerilor leucocitari și mortalitatea pentru toate cauzele, bolile cardiovasculare și cancerul: rezultate din meta-analiză a datelor individuale-participanți a 2 studii de cohortă mari prospective. Am J Epidemiol. 2017;185:1317–1326.
6. Wang Q, Zhan Y, Pedersen NL, et al. Lungimea telomerilor și mortalitatea de toate cauzele: o meta-analiză. Aging Res Rev. 2018;48:11–20.
7. Wills LP, Schnellmann RG. Telomerii și telomeraza în sănătatea renală. J Am Soc Nephrol. 2011;22:39–41.
8. Kordinas V, Tsirpanlis G, Nicolaou C, et al. Există o legătură între inflamație, activitatea telomerazei și starea transcripțională a revers transcriptazei telomerazei în insuficiența renală? Cell Mol Biol Lett. 2015;20:222–236.
9. Cañadas-Garre M, Anderson K, Cappa R, et al. Susceptibilitate genetică la boala cronică de rinichi - câteva piese mai multe pentru puzzle-ul eredității. Front Genet. 2019;10:453.
10. Satko SG, Freedman BI. Agruparea familială a bolii renale și a fenotipurilor înrudite. Med Clin North Am. 2005;89:447–456.
11. Regele F, Jelencsics K, Shiffman D, et al. Studii la nivelul genomului pentru a identifica factorii de risc pentru boli de rinichi, cu accent pe pacienții cu diabet. Transplant Nephrol Dial. 2015;30:iv26–iv34.
12. Wuttke M, Köttgen A. Perspective în bolile de rinichi din studii de asociere la nivelul genomului. Nat Rev Nephrol. 2016;12:549–562.
13. Böger CA, Gorski M, Li M, et al. Asocierea loci legate de eGFR identificate de GWAS cu incidente CKD și ESRD. PLoS Genet. 2011;7: e1002292.
14. Chambers JC, Zhang W, Lord GM și colab. Loci genetici care influențează funcția renală și boala cronică de rinichi. Nat Genet. 2010;42:373–375.
15. Köttgen A, Pattaro C, Böger CA, et al. Loci noi asociati cu funcția renală și boala cronică de rinichi. Nat Genet. 2010;42:376–384.
16. Pattaro C, Teumer A, Gorski M, et al. Asociațiile genetice la 53 de loci evidențiază tipurile de celule și căile biologice relevante pentru funcția rinichilor. Nat Commun. 2016;7:10023.
17. Wuttke M, Li Y, Li M și colab. Un catalog de loci genetici asociați cu funcția rinichilor din analize a unui milion de indivizi. Nat Genet. 2019;51:957–972.
18. Bansal N, Whooley MA, Regan M, et al. Asocierea dintre funcția rinichilor și lungimea telomerilor: studiul inimii și sufletului. Sunt J Nephrol. 2012;36:405–411.
19. Eguchi K, Honig LS, Lee JH, et al. Lungimea scurtă a telomerilor este asociată cu insuficiență renală la subiecții japonezi cu risc cardiovascular. Plus unu. 2017;12:e0176138.
20. Wong LSM, Van Der Harst P, De Boer RA, et al. Disfuncția renală este asociată cu o lungime mai scurtă a telomerilor în insuficiența cardiacă. Clin Res Cardiol. 2009;98:629–634.
21. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Asocierea lungimii relative a telomerilor cu boala cardiovasculară într-o cohortă mare de boli renale cronice: studiul GCKD. Ateroscleroza. 2015;242:529–534.
22. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Au telomerii o plasticitate mai mare decât se credea? Rezultatele studiului German Chronic Kidney Disease (GCKD) ca populație cu risc ridicat. Exp Gerontol. 2015;72: 162–166.
23. Raschenberger J, Kollerits B, Ritchie J, et al. Asocierea lungimii relative a telomerilor cu progresia bolii renale cronice în două cohorte: modificarea efectului prin fumat și diabet. Sci Rep. 2015;5:1–8.
24. Betjes MGH, Langerak AW, Van Der Spek A, et al. Îmbătrânirea prematură a celulelor T circulante la pacienții cu boală renală în stadiu terminal. Rinichi Int. 2011;80:208–217.
25. Hirashio S, Nakashima A, Doi S, et al. Lungimea cozii G telomerică și spitalizare pentru evenimente cardiovasculare la pacienții cu hemodializă. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:2117–2122.
26. Ramírez R, Carracedo J, Soriano S, et al. Senescența prematură indusă de stres în celulele mononucleare de la pacienții aflați în hemodializă pe termen lung. Am J Rinichi Dis. 2005;45:353–359.
27. Tsirpanlis G, Chatzipanagiotou S, Boufidou F, et al. Activitatea telomerazei este scăzută în celulele mononucleare din sângele periferic ale pacienților cu hemodializă. Sunt J Nephrol. 2006;26:91–96.
28. Carrero JJ, Stenvinkel P, Fellström B, et al. Uzura telomerilor este asociată cu inflamație, niveluri scăzute de fetuină A și mortalitate ridicată la pacienții cu hemodializă prevalenți. J Intern Med. 2008;263:302–312.
29. Mazidi M, Rezaie P, Covic A, et al. Uzura telomerilor, funcția rinichilor și boala renală cronică prevalentă în Statele Unite. Oncotarget. 2017;8:80175–80181.
30. Kidir V, Aynali A, Altuntas A, et al. Activitatea telomerazei la pacienții cu boală renală cronică în stadiul 2-5D. Nefrologia. 2017;37:592–597.
31. Batsis JA, Mackenzie TA, Vasquez E, et al. Asocierea adipozității, a lungimii telomerilor și a mortalității: date din NHANES 1999-2002. Int J Obes. 2018;42:198–204.
32. Fitzpatrick AL, Kronmal RA, Kimura M, et al. Lungimea telomerilor leucocitari și mortalitatea în studiul de sănătate cardiovasculară. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2011;66A:421–429.
33. Needham BL, Rehkopf D. Lungimea telomerilor leucocitari și mortalitatea în ancheta națională de examinare a sănătății și nutriției, 1999–2002. Epidemiologie. 2015;26:528–535.
34. Pusceddu I, Kleber M, Delgado G, et al. Lungimea telomerelor și mortalitatea în studiul Ludwigshafen privind riscul și sănătatea cardiovasculară. Plus unu. 2018;13:e0198373.
35. Rode L, Nordestgaard BG, Bojesen SE. Lungimea telomerilor leucocitelor din sângele periferic și mortalitatea la 64 637 indivizi din populația generală. J Natl Cancer Inst. 2015;107:djv074.
36. Loprinzi PD, Loenneke JP. Lungimea telomerilor leucocitari și mortalitatea în rândul adulților din SUA: modificarea efectului prin comportamentul activității fizice. J Sports Sci. 2018;36:213–219.
37. Gao X, Zhang Y, Mons U, et al. Lungimea telomerilor leucocitari și scorul de risc de mortalitate bazat pe epigenetică: asocieri cu mortalitatea de toate cauzele în rândul adulților în vârstă. Epigenetica. 2018;13:846–857.
38. D'Mello MJJ, Ross SA, Briel M, et al. Asocierea între lungimea scurtă a telomerilor leucocitari și rezultatele cardiometabolice: revizuire sistematică și meta-analiză. Circ Cardiovasc Genet. 2015;8:82–90.
39. Haycock PC, Heydon EE, Kaptoge S, et al. Lungimea telomerilor leucocitari și riscul bolilor cardiovasculare: revizuire sistematică și meta-analiză. BMJ. 2014;349:g4227.
40. Madrid AS, Rode L, Nordestgaard BG, et al. Lungime scurtă a telomerilor și
cardiopatie ischemică: studii observaționale și genetice la 290.022 de indivizi. Clin Chem. 2016;62:1140–1149.
41. Mwasongwe S, Gao Y, Griswold M, et al. Lungimea telomerilor leucocitari și boli cardiovasculare la afro-americani: Studiul Jackson Heart. Ateroscleroza. 2017;266:41–47.
42. Helby J, Nordestgaard BG, Benfield T, et al. Lungimea mai scurtă a telomerilor leucocitari este asociată cu un risc mai mare de infecții: un studiu prospectiv pe 75.309 de indivizi din populația generală. Haematologica.2017;102:1457–1465.
43. Cawthon RM, Smith KR, O'Brien E, et al. Asocierea dintre lungimea telomerilor din sânge și mortalitate la persoanele cu vârsta de 60 de ani sau mai mult. Lancet. 2003;361:393–395.
44. Njajou OT, Hsueh WC, Blackburn EH, et al. Asocierea dintre lungimea telomerilor, cauzele specifice de deces și ani de viață sănătoasă în sănătate, îmbătrânire și compoziție corporală: un studiu de cohortă bazat pe populație. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2009;64:860–864.
45. Codd V, Nelson CP, Albrecht E, et al. Identificarea a șapte loci care afectează lungimea medie a telomerilor și asocierea lor cu boala. Nat Genet. 2013;45:422–427.
46. Zhan Y, Hägg S. Lungimea telomerelor și riscul bolilor cardiovasculare. Curr Opin Cardiol. 2019;34:270–274.
47. Stenvinkel P, Luttropp K, McGuinness D, et al. Expresia CDKN2A/p16INK4a este asociată cu progeria vasculară în boala cronică de rinichi.
Îmbătrânire (Albany. NY). 2017;9:494–507.
48. Wilson WRW, Herbert KE, Mistry Y, et al. Conținutul de ADN al telomerilor din sângele leucocitelor prezice conținutul de ADN al telomerilor vasculari la oameni cu și fără boală vasculară. Eur Heart J. 2008;29:2689–2694.
49. Matsumoto C, Jiang Y, Emathinger J, et al. Telomerii scurti induc p53 și autofagia și modulează modificările asociate vârstei în soarta celulelor progenitoare cardiace. Celule stem. 2018;36:868–880.
50. Lai L, Leone TC, Zechner C, et al. Coactivatorii transcripționali PGC-la și PGC-lb controlează programele suprapuse necesare pentru maturarea perinatală a inimii. Genes Dev. 2008;22:1948–1961.
51. Moslehi J, Depinho RA, Sahin E. Telomeres and mitochondria in the aging heart. Circ Res. 2012;110:1226–1237.
52. Rufer N, Brümmendorf TH, Kolvraa S, et al. Măsurătorile fluorescenței telomerilor în granulocite și subseturi de limfocite T indică un nivel ridicat.