Cititorul ARN M6 A YTHDF2 controlează imunitatea antitumorală și antivirală a celulelor NK Partea 6

Modelul de melanom metastatic și provocarea MCMV

Celulele B16F10 (105) au fost injectate iv la șoareci. La 14 zile după injectare, șoarecii au fost eutanasiați pentru analiză post-mortem. Nodulii metastatici din plămâni au fost analizați macroscopic și numărați. Linia celulară B16F10 a fost furnizată de Hua Yu (City of Hope, Los Angeles, CA). Șoarecii Ythdf2ΔNK și Ythdf2WT au fost infectați cu o injecție ip de tulpina Smith MCMV (2,5 × 104 PFU), care a fost achiziționată de la American Type Culture Collection (VR-1399). Probele de sânge periferic au fost obținute prin puncție submandibulară în zilele 0, 4 și 7 după infecție.

Nodulii de metastază pulmonară se referă la nodulii formați din celule tumorale maligne din alte locuri care migrează către plămâni prin sânge sau sistemul limfatic. Pentru mulți pacienți, aceasta este o manifestare comună a cancerului pulmonar.

Cu toate acestea, deși nodulii de metastază pulmonară reprezintă o amenințare pentru sănătatea fizică a pacienților, nu există o relație directă între ei și memorie. Prin urmare, ar trebui să ne confruntăm în mod activ cu provocările cancerului pulmonar și ale nodulilor de metastază pulmonară și să nu lăsăm emoțiile negative și anxietatea să ne afecteze sănătatea fizică și mentală.

În același timp, putem menține și îmbunătăți memoria prin unele metode pozitive. De exemplu, efectuați unele antrenamente ale memoriei, cum ar fi calcule matematice, citit, ascultarea muzicii, jocurile etc. În plus, aderarea la obiceiuri bune de viață, cum ar fi exercițiile regulate, somnul suficient, mâncatul sănătos etc. ne îmbunătățim memoria.

Cel mai important lucru este să păstrezi o atitudine pozitivă. Indiferent de dificultățile cu care te confrunți, trebuie să crezi în puterea ta și în flexibilitatea sistemului tău nervos, iar prin ajustări și răspunsuri pozitive, vei depăși în cele din urmă cu succes dificultățile.

Pe scurt, deși nodulii metastatici din plămâni reprezintă o amenințare pentru sănătatea fizică, ei nu sunt direct legați de memorie. Ar trebui să o înfruntăm pozitiv și să ne menținem și să ne îmbunătățim memoria ajustând stilul de viață și menținând o atitudine bună. Se poate observa că trebuie să îmbunătățim memoria, iar Cistanche deserticola poate îmbunătăți semnificativ memoria, deoarece Cistanche deserticola poate regla și echilibrul neurotransmițătorilor, cum ar fi creșterea nivelului de acetilcolină și a factorilor de creștere. Aceste substanțe sunt foarte importante pentru memorie și învățare. În plus, Cistanche deserticola poate, de asemenea, să îmbunătățească fluxul sanguin și să promoveze livrarea de oxigen, ceea ce poate asigura că creierul primește suficiente nutrienți și energie, îmbunătățind astfel vitalitatea și rezistența creierului. Se poate observa că trebuie să îmbunătățim memoria, iar Cistanche deserticola poate îmbunătăți semnificativ memoria, deoarece Cistanche deserticola poate regla și echilibrul neurotransmițătorilor, cum ar fi creșterea nivelului de acetilcolină și a factorilor de creștere. Aceste substanțe sunt foarte importante pentru memorie și învățare. În plus, Cistanche deserticola poate, de asemenea, să îmbunătățească fluxul sanguin și să promoveze livrarea de oxigen, ceea ce poate asigura că creierul primește suficiente nutrienți și energie, îmbunătățind astfel vitalitatea și rezistența creierului.

Faceți clic pe cunoașteți suplimentele pentru a crește memoria

Pentru a măsura încărcăturile virale în sângele periferic, splină și ficat, ADN-ul a fost izolat utilizând un kit QIAGEN DNeasy Blood and Tissue pentru analiza qPCR. Au fost utilizați următorii primeri: MCMV-IE1,59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (înainte) și MCMVIE1, ​​59-GCCCCAACCAGGACACACACAACTC-39 (invers).

Tratament in vivo la șoarece cu IL-15

Pentru tratamentul in vivo la șoarece cu IL-15, șoarecii Ythdf2ΔNK și Ythdf2WT au fost injectați cu 2 ug ip recombinant IL-15 uman (cat.nr. 745101; Institutul Național al Cancerului) timp de 5 zile. Șoarecii tratați și de control au fost apoi eutanasiați pentru o analiză citometrică în flux.

Citometrie în flux

Suspensiile unicelulare au fost preparate din BM, sânge, splină, ficat și plămân de șoareci Ythdf2ΔNK și Ythdf2WT așa cum s-a descris anterior (Wang și colab., 2018b). Analiza citometriei în flux și sortarea celulelor au fost efectuate pe un LSRFortessa X-20 și, respectiv, pe un FACSAriaFusion Flow Cytometer (BD Biosciences).

Datele au fost analizate folosind software-ul NovoExpress (Agilent Technologies).

Au fost utilizați următorii anticorpi marcați cu colorant fluorescent de la BD Biosciences, BioLegend, Invitrogen sau Cell Signaling Technology: CD3ε (145-2C11), CD19 (1D3), Gr-1 (RB{6-8C5). ),TER-119 (TER-119), CD11c (N418), CD4 (GK1.5), CD8 (53-6.7),CD122 (5H4), CD132 (TUGm2), NK1.1 (PK136), CD11b (M1/70), CD27 (LG.3A10), CD117 (2B8), CD127 (SB/199), CD135 (A2F10.1), KLRG1 (2F1), CD45 ({{46) }}F11), CD45.1 (A20), CD45.2 (104), IFN- (XMG1.2), 2B4 (m2B4), granzima B (QA16A02), perforină (S16009A), Ly49H (3D10), Ly49D ( 4e5), CD69 (H1.2F3), CD226(TX42.1), NKG2D (CX5), NKG2A (16A11), NKp46 (29A1.4), TIGIT(1G9), PD-1 (J43), anexină V, Ki67 (b56), Tbet (4b10) și Eomes (WD1928), fosfo-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204, #9101), fosfo-Akt (Ser473, #5315), proteină ribozomală fosfo-S6 ,fosfo-Stat3 (Tyr705, #9145) și fosfo-Stat5 (Tyr694, #9539).

Pentru evaluarea proliferării celulelor NK, celulele au fost etichetate cu 5 pM CTV (Invitrogen) conform protocolului producătorului înainte de a le transfera la șoareci receptor. Colorarea intracelulară a Ki67, Tbet și Eomes a fost efectuată prin fixarea și permeabilizarea cu kitul de colorare Foxp3/Factor de transcripție (eBioscience).

Pentru detectarea proteinelor fosforilate, celulele NK splenice purificate au fost pretratate cu IL{0}} uman recombinant (50 ng/ml) timp de 1 oră și apoi fixate cu Phosflow Fix Buffer I urmată de permeabilizare cu Phosflow Perm Buffer III (BD Biosciences) și colorare cu anticorpi.

Transferul de celule adoptive

Pentru a evalua efectul deficienței Ythdf2 asupra maturării celulelor NK, un amestec de 5 × 106 celule BM la un raport 1:1 de la șoarecii CD45.1 sau Ythdf2ΔNK CD45.2 a fost cotransferat în șoareci Rag2-/-Il2rg-/-. Reconstituirea primitorilor a fost evaluată prin citometrie în flux8 săptămâni după transplant.

Pentru experimentele de proliferare homeostatică indusă de limfopenie, un număr egal de celule NK splenice purificate de la șoareci CD45.1 sau Ythdf2ΔNK CD45.2 au fost cotransferate în șoareci Rag2−/−Il2rg−/−, urmate de evaluarea procentelor relative de celulele WT și YthdfKΔNK transferate în celulele NK2. a receptorilor Rag2−/−Il2rg−/− prin citometrie în flux la momentele de timp indicate.

Pentru modelul de melanom metastatic, 106 IL-2-celule NK extinse de la șoareci Ythdf2ΔNK sau Ythdf2WT au fost injectate iv în șoareci Rag2-/-Il2rg-/-. 1 zi mai târziu, celulele B16F10 (105) au fost injectate iv la șoareci. La 14 zile după injectare, șoarecii au fost eutanasiați pentru analiza post-mortem. În unele experimente, celulele au fost marcate cu CTV (5 pM, Invitrogen) pentru a urmări proliferarea celulară înainte de transfer.

Test de trafic in vivo

Pentru detectarea traficului de celule NK de la BM la sângele periferic, 1 pg iv anticorp anti-CD45 marcat cu APC a fost injectat în șoareci C57BL/6. La două minute după injectarea cu anticorpi, micocii au fost eutanasiați imediat și celulele BM au fost colectate pentru citometrie în flux după ce celulele au fost colorate cu anticorpi CD3 și NK1.1. Celulele NK parenchimale au fost identificate prin lipsa colorării CD45, în timp ce celulele NK sinusoidale au fost identificate prin prezența etichetării CD45. Prin urmare, raportul dintre celulele NK din sinusoide (CD45+) și cel din regiunile parenchimatoase (CD45−) indică traficul de celule NK din sângele BM spre periferic în stare de echilibru.

RT-qPCR în timp real și imunoblot

ARN-ul a fost izolat utilizând un RNeasy Mini Kit (QIAGEN) și apoi transcris invers la cADN cu PrimeScript RT Reagent Kit cu gDNA Eraser (Takara Bio) conform instrucțiunilor producătorului. Nivelurile de expresie ARNm au fost analizate folosind SYBRGreen PCR Master Mix și un sistem QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR (ambele de la Thermo Fisher Scientific). Secvențele de primer sunt enumerate în Tabelul S1.

Imunoblotarea a fost efectuată conform procedurilor standard, așa cum s-a descris anterior (Denget al., 2015; Yu et al., 2006). Au fost utilizați următorii anticorpi: METTL3 (cat. nr. 15073-1-AP; Proteintech), METTL14 (cat. nr.26158-1-AP; Proteintech), YTHDF1 (cat. nr. 17479-1-AP ; Proteintech), YTHDF2 (cat. nr. RN123PW; MBL), YTHDF3 (cat. nr. 25537-1-AP; Proteintech), ALKBH5 (cat. nr. ab195377; Abcam), FTO (cat. nr. ab124892; Abcam), MDM2 (nr. cat. 33-7100; Invitrogen), TDP-43 (nr. cat. PA{{5-29949; Invitrogen) și -actin (nr. cat. {{20} }}Ig; Proteintech).

testul de eliminare a siRNA

IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90% măsurată prin citometrie în flux. Eficiența Geneknockdown a fost determinată prin qPCR și imunoblot. 3 zile după transfecție, apoptoza celulară și proliferarea au fost analizate prin citometrie în flux așa cum este descris mai sus.

Testul reporter al luciferazei

Regiunea promotor Ythdf2 variind de la –2,000 bp la +100 bpo din TSS a fost amplificată din celulele NK murine și donată în apGL4-Basic Luciferase Reporter Vector (Promega) pentru a genera apGL{ {5}}Plasmidă reporter Ythdf2. Celulele HEK293T achiziționate de la ATCC au fost cotransfectate cu plasmide reporter pGL4-Ythdf2, precum și plasmide de supraexpresie STAT5a sau STAT5b sau un vector gol, împreună cu o plasmidă reporter pRL-TK Renilla (Promega) pentru normalizarea eficienței transfecției. Celulele au fost recoltate pentru liză la 24 de ore după transfecție, iar activitatea luciferazei a fost cuantificată fluorimetric cu Dual-LuciferaseSystem (Promega). Secvențele de primer pentru donarea promotorului Ythdf2 și plasmidele de supraexpresie STAT5a și STAT5b sunt enumerate în Tabelul S1.

teste ChIP

Testele ChIP au fost efectuate folosind un kit Pierce Magnetic ChIP (nr. cat. 26157; Thermo Fisher Scientific) conform instrucțiunilor producătorului. Pe scurt, o cantitate egală de ananti-anti-fosfo-Stat5 (Tyr694, nr. cat. 9351; Cell Signaling Technologies) sau IgG normală de iepure de control corespunzătoare a fost utilizată separat pentru a precipita complexele ADN-proteine ​​reticulate derivate din 5 × 106 celule NK primare de șoarece purificate care au fost pretratate cu IL-15 (50 ng/ml) timp de 1 oră. După inversarea reticulării, ADN-ul imunoprecipitat de anticorpul indicat a fost testat prin qPCR. Secvențele tuturor primerilor sunt listate în Tabelul S1.

Test de citotoxicitate ex vivo

Citotoxicitatea ex vivo a celulelor NK a fost evaluată prin teste standard de 51Crrelease. Liniile de celule de limfom de șoarece RMA-S (clasa MHC deficitară) și celulele RMA (clasa MHC I suficientă), un cadou al lui Andre’Veillette (Universitatea McGill, Montreal, Canada), au fost utilizate ca celule țintă. Şoarecii au fost trataţi cu injecţie ip de acid poliinozinic:policitidilic [poli (I: C); 200 ug/șoareci] timp de 18 ore. Celulele NK activate cu poli(I: C) au fost izolate din splină utilizând Kitul de izolare a celulelor NK EasySepMouse (STEMCELL Technologies). Celulele NK purificate au fost cocultivate cu celule țintă într-un raport de 5:1, 2,5:1 și 1,25:1 în prezența IL-2 (50 U/ml).

m6A-următoarele

Celulele NK splenice purificate au fost extinse cu IL-2 (1,000 U/ml, cat. nr. Bulk Ro 23-6019; Institutul Național al Cancerului) in vitro pentru 7 zile. ARN-ul total a fost izolat prin reactiv TRIzol (Thermo FisherScientific) din 50 de milioane de celule NK extinse IL-2. ARN-ul poliadenilat a fost îmbogățit în continuare din ARN total prin utilizarea Kitului de purificare ARNm Dynabeads (Invitrogen). Probele de ARNm au fost fragmentate în fragmente 100-nt lungi cu reactivi de fragmentare a ARN (Invitrogen).

ARNm fragmentat (5 pgmARN) a fost utilizat pentru imunoprecipitarea m6A folosind un anticorp m6A (202003; Synaptic) urmând protocolul standard al kitului Magna MeRIP m6A (Merck Millipore). ARN a fost îmbogățit prin ARN Clean & Concentrator-5 (Zymo Research) pentru generarea de biblioteci cu un KAPA ARN HyperPrep Kit (Roche). Secvențierea a fost efectuată la unitatea de genomică City of Hope pe o mașină Illumina HiSeq 2500 cu modul de citire unică 50-bp. Citirile de secvențiere au fost mapate la genomul șoarecelui folosind software-ul HISAT2 v101 (Kim și colab., 2015).

Citirile cartografice ale imunoprecipitării și bibliotecile de intrare au fost furnizate folosind pachetul R exomePeak (Meng și colab., 2014). m6Apeaks au fost vizualizate folosind software-ul Integrative Genomics Viewer (http://www.igv.org). Motivul de legare a m6A a fost analizat de MEME (https://meme-suite.org) și HOMER (http://homer.ucsd.edu/homer/motif). Vârfurile numite au fost adnotate prin intersecția cu arhitectura genelor folosind Rpackage ChIPseeker (Yu și colab., 2015).

StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 orlog2 (schimbare ori)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).

YTHDF2 RIP-seq

50 milioane de IL-2-celule NK expandate au fost recoltate și spălate de două ori cu PBS rece, iar peletul celular a fost lizat cu tampon de ofliză de 2 vol. (10 mM Hepes, pH 7,6, 150). mM KCI, 2 mM EDTA, 0,5% NP-40, 0,5 mM ditiotreitol, cocktail de inhibitor de protează 1:100 [Thermo Fisher Scientific] și 400 U/ml de inhibitor de RNază SUPERază-In [Thermo Fisher Scientific]).

Lizatul a fost incubat pe gheață timp de 5 minute și centrifugat timp de 15 minute pentru a limpezi lizatul. O zecime din volumul de lizat celular a fost salvat ca intrare. Restul din lizat de celule a fost incubat cu 5 ug anti-YTHDF2 (cat.nr. RN123PW; MBL) care a fost cuplat cu Protein A Magnetic Beads (cat. nr. 10001D; Invitrogen) la 4 grade timp de 2 ore cu rotatie usoara. După aceea, bilele au fost spălate de cinci ori cu 1 ml tampon de spălare rece cu gheață (50 mM HEPES, pH 7,6200 mM NaCI, 2 mM EDTA, 0,05% NP-40, 0,5 mM ditiotreitol și 200 U/ml RNază). inhibitor).

Probele imunoprecipitate au fost supuse digestiei cu Proteinaza K în tampon de spălare suplimentat cu 1% SDS și 2 mg/ml Proteinaza K (ThermoFisher Scientific) incubate cu agitare la 1200 rpm la 55 de grade timp de 1 oră. ARN-ul total a fost extras atât din ARN de intrare, cât și din ARN imunoprecipitat prin adăugarea de 5 vol. reactiv TRIzol urmat de Direct-zol ARN Miniprep (Zymo Research).

Biblioteca de ADNc a fost generată cu un kit KAPA ARN HyperPrep (Roche) și secvențializată pe o platformă Illumina HiSeq 2500. Rezultatele maxime de apelare cu imunoprecipitare și biblioteci de intrare au fost generate de pachetul R RIPSeeker (Li și colab., 2013). HOMER a fost folosit pentru a găsi motive ale distribuției datelor în regiunile de vârf. Vârfurile numite au fost adnotate prin intersecția cu arhitectura genelor și transcripției folosind ChIPpeakAnno (Zhu și colab., 2010).

testul de stabilitate ARNm

Celulele NK splenice purificate de la șoareci Ythdf2ΔNK și Ythdf2WT au fost cultivate cu IL-15 (50 ng/ml). La 3 zile după cultură, celulele au fost tratate cu actinomicină D (5 pg/ml, cat. nr. A9415; Sigma) pentru timpul indicat. Celulele fără tratament au fost utilizate la 0 h. Celulele au fost colectate la momentul indicat și ARN total a fost extras din celule pentru qPCR. Timpul de înjumătățire al ARNm a fost calculat folosind metoda descrisă anterior de Weng și colab. (2018). Secvențele de primer sunt enumerate în Tabelul S1.

Analiza bazei de date online

Am folosit resursa online BioGPS (http://biogps.org) pentru a analiza expresia specifică țesutului a Ythdf2. Seturile de date ARN-seqdate au fost de la GEO sub nr. GSE106138, GSE113214 și GSE25672. Au fost exportate date normalizate din analizele ARN-seq, iar scorul z al expresiei genice a fost vizualizat cu funcția Heatmap.2 din gplots Rlibrary

Statistici

Testele t Student nepereche (cu două cozi) au fost efectuate folosind software-ul GraphPad Prism. ANOVA unidirecțională sau bidirecțională a fost efectuată atunci când au fost comparate trei sau mai multe grupuri independente. Valorile P au fost ajustate pentru comparații multiple utilizând procedura Holm-Sˇ´ıdak. P < 0.05 a fost considerat semnificativ. *, P < {{10}},05; **, P <0,01; și ***, P < 0,001.

Material suplimentar online

Fig. S1 prezintă nivelurile de proteine ​​ale YTHDF2 în celulele imune, inclusiv celulele NK ca răspuns la stimularea IL-15, infecția cu MCMV și progresia tumorii; generarea de șoareci cu ștergerea specifică a celulei NK a Ythdf2. Fig. S2 prezintă titrurile virale în splină și ficat de la șoareci infectați cu MCMV și procentul și numărul absolut de celule NK Ly49H+ și/sau Ly49D+ la șoarecii infectați cu MCMV. Fig. S3 prezintă proliferarea, supravieţuirea, maturarea şi expresia receptorilor activatori şi inhibitori ai celulelor NK de la şoarecii Ythdf2WT şi Ythdf2ΔNK. Fig. S4 arată reglarea expresiei YTHDF2 prin semnalizarea IL-15-STAT5 și expresia componentelor receptorilor IL{-15, calea PI3K–AKT și calea MEK–ERK în celulele NK din Ythdf2WT și Ythdf2ΔNK soareci. Fig. S5 prezintă analize ARN-seq, m6A-seq și RIP-seq la nivelul întregii celule NK. Tabelul S1 enumeră primerii utilizați în studiu.

Disponibilitatea datelor

Datele ARN-seq, m6A-seq și RIP-seq au fost depuse în Centrul Național de Informații Biotehnologice GEO sub nr. GSE174027. Datele rămase care susțin concluziile acestui studiu sunt disponibile de la autorii corespunzători, la cerere.

Mulțumiri

Această lucrare a fost susținută de National Institutes of Health (NS106170, AI129582, CA247550, CA163205, CA223400, CA068458 și CA210087), Societatea Leucemiei și Limfomului (1364-19), Institutul California pentru Medicină Regenerativă ({{DISC2COVID) 9}}) și Breast Cancer Alliance 2021 Exceptional ProjectAward. Această activitate a fost susținută parțial de un USDAaward (USDA/NIFA 2020-67017-30843).

Contribuțiile autorilor: S. Ma, J. Yu și MA Caligiuri au conceput și conceput proiectul. S. Ma, J. Yan, J. Zhang și J. Yu a efectuat experimente și/sau analize de date. Z. Chen, L.-S.Wang, JC Sun și J. Chen au contribuit cu reactivi și suport material. S. Ma, J. Yu, J. Chen și MA Caligiuri au scris, revizuit și/sau revizuit lucrarea. Toți autorii au discutat rezultatele și au comentat manuscrisul.

Dezvăluiri: J. Chen a raportat „altul” de la Genovel BiotechCorp. în afara lucrării prezentate și este un fondator științific al Genovel Biotech Corp. și un consilier științific al oncologiei rasiale. Nu au fost raportate alte dezvăluiri.

Referințe

1.Arase, H., ES Mocarski, AE Campbell, AB Hill și LL Lanier. 2002.Recunoașterea directă a citomegalovirusului prin activarea și inhibiția receptorilor celulelor NK. Ştiinţă. 296:1323–1326.

2.Ayala, YM, T. Misteli și FE Baralle. 2008. TDP-43 reglează fosforilarea proteinei retinoblastomului prin reprimarea expresiei kinazei 6 dependente de ciclină. Proc. Natl. Acad. Sci. STATELE UNITE ALE AMERICII. 105:3785–3789.

3.Barbieri, I., K. Tzelepis, L. Pandolfini, J. Shi, G. Millan-Zambrano, SC Robson, ´D. Aspris, V. Migliori, AJ Bannister, N. Han, et al. 2017. METTL3 legat de promotor menține leucemia mieloidă prin controlul translației dependent de m6A. Natură. 552:126–131.

4.Becknell, B., and MA Caligiuri. 2005. Interleukina-2, interleukina-15 și rolurile lor în celulele ucigașe naturale umane. Adv. Imunol. 86:209–239.

5.Bertoli, C., JM Skotheim și RA de Bruin. 2013. Controlul transcripției ciclului celular în fazele G1 și S. Nat. Pr. Mol. Cell Biol. 14:518–528.

6.Bezman, NA, CC Kim, JC Sun, G. Min-Oo, DW Hendricks, Y. Kamimura, JA Best, AW Goldrath și LL Lanier. Consorțiul Proiectului Imunologic Genome. 2012. Definiția moleculară a identității și activării celulelor natural killer. Nat. Imunol. 13:1000–1009.

7.Carson, WE, JG Giri, MJ Lindemann, ML Linett, M. Ahdieh, R. Paxton, D.Anderson, J. Eisenmann, K. Grabstein și MA Caligiuri. 1994. Interleukina (IL) 15 este o nouă citokină care activează celulele ucigașe naturale umane prin intermediul componentelor receptorului IL-2. J. Exp. Med. 180:1395–1403.

8.Carson, WE, TA Fehniger, S. Haldar, K. Eckhert, MJ Lindemann, CF Lai, CM Croce, H. Baumann, and MA Caligiuri. 1997. Un rol potențial al interleukinei-15 în reglarea supraviețuirii celulelor ucigașe naturale umane.J. Clin. Investi. 99:937–943.

9.Chan, CJ, MJ Smyth și L. Martinet. 2014. Mecanismele moleculare ale activării celulelor ucigașe naturale ca răspuns la stresul celular. Moartea celularăDifer. 21:5–14.

10.Chen, X., J. Han, J. Chu, L. Zhang, J. Zhang, C. Chen, L. Chen, Y. Wang, H.Wang, L. Yi și colab. 2016. Terapia combinată a celulelor EGFR-CAR NK și a virusului herpes simplex oncolitic 1 pentru metastazele cerebrale ale cancerului de sân.Oncotarget. 7:27764–27777.

For more information:1950477648nn@gmail.com