Rolul anhidrazelor carbonice în stingerea memoriei fricii contextuale

Pentru mai multe informatii:ali.ma@wecistanche.com

Anhidrazele carbonice (CA; EC 4.2.1.1) sunt metaloenzime prezente la mamifere cu 16 izoforme care diferă în ceea ce privește activitatea catalitică, precum și distribuția celulară și tisulară. CAS catalizează conversia CO în bicarbonat și protoni și este implicat în diferite procese fiziologice, inclusivînvăţare şi memorie.Aici raportăm că integritatea activității CA în creier este necesară pentru consolidarea dispariției friciimemorie.Am descoperit că administrarea sistemică de acetazolamidă, un inhibitor de CA, imediat după sesiunea de extincție a afectat în funcție de doză consolidarea stingerii fricii.memoriede șobolani antrenați în condiționarea fricii contextuale. D-fenilalanina, un activator de CA, a afișat o acțiune opusă, în timp ce C18, un inhibitor de CA impermeabil la membrană, care nu poate ajunge la țesutul cerebral, nu a avut niciun efect. Administrarea simultană de acetazolamidă a prevenit complet efectele procognitive ale D-fenilalaninei. În timp ce D-fenilalanina a potențat extincția, acetazolamida a afectat extincția și atunci când a fost infuzată local în cortexul prefrontal ventromedial, amigdala bazolaterală sau regiunea CA1 hipocampală. Mai mult, administrarea sistemică a acetazolamidei imediat după sesiunea de antrenament pentru extincție a modulat expresia c-Fos pe un test de retenție în cortexul prefrontal ventromedial al șobolanilor antrenați în condiționarea fricii contextuale. Aceste constatări dezvăluie că angajarea CA în unele regiuni ale creierului este esențială pentru a oferi creierului rezistența necesară pentru a asigura consolidarea dispariției evenimentelor semnificative din punct de vedere emoțional.

Click pentru beneficiile cistanche tubulosa și efectele secundare și produsele Cistanche pentru memorie

Experiențele emoționale lasă urme de lungă durată în creier, cum ar fi amintirile care se formează în urma unor evenimente stresante pot fi inițial labile, dar în timp pot deveni insensibile la perturbări și pot dura toată viața printr-un proces cunoscut sub numele de consolidare (1-3). Acestmemoriepersistența este esențială pentru ca indivizii să răspundă în mod adecvat la pericol (4,5). Perturbarea acestor amintiri poate declanșa răspunsuri dezadaptative în boli mintale precum tulburările obsesiv-compulsive. fobii. tulburare de stres posttraumatic (PTSD) și anxietate generalizată(6,7). Perspectivele care conduc la tratamente îmbunătățite ale acestor tulburări pot fi obținute printr-o mai bună înțelegere a mecanismelor neuronale care stau la bazamemorie emoțională. Memoria este un proces în mai multe etape care include achiziția. consolidare și recuperare (8). Recuperarea reactivează o urmă mnemonică, readucerea acesteia la o stare labilă și, în consecință, inițiind reconsolidarea sau extincția ei. Reconsolidarea permite actualizarea memoriei originale, făcând-o persistentă (9-11). În schimb, extincția se referă la o nouă urmă de memorie care inhibă regăsirea memoriei originale (12,13).

Sarcinile de învățare motivate de frică au contribuit în mare măsură la cunoașterea disparițieimemorieși sunt considerate un model translațional valoros pentru investigarea tulburărilor precum fobiile, anxietatea și PTSD (5.12.14). Extincția formează baza terapiei de expunere (15-17), în prezent tratamentul standard de aur pentru aceste tulburări(18,19). Cu toate acestea, nu toți pacienții experimentează efectele benefice ale acestei terapii. Din moment ce dispariția nu șterge originalulmemoriedar este o nouă învățare care îi inhibă exprimarea (20), comportamentele stinse se pot recupera spontan în timp (21, 22). Medicamentele care promovează dispariția fricii ar putea reprezenta o strategie terapeutică nouă pentru tratarea acestor tulburări (19. 23-25)

Anhidrazele carbonice (CA; EC4.2.1.1) sunt enzime prezente la mamifere cu 16 izoforme care diferă în ceea ce privește activitatea catalitică, precum și distribuția celulară și tisulară (26). CAS catalizează conversia CO în bicarbonat și protoni și este implicat în mai multe procese fiziologice(27), inclusivmemorieformarea (28).S-a constatat că activarea CA ameliorează spațialmemoriela șobolani (29). În conformitate cu aceste constatări, șoarecii cu deficit genetic în izoforma CA IX au avut rezultate mai slabe în aceeași sarcină decât tovarășii de tip sălbatic (30). Mai recent, s-a raportat că administrarea inhibitorului de CA acetazolamidă (ACTZ) (31) utilizat pe scară largă la șoareci CD1 a redus activitatea CA în creier și a provocat amnezie în testul de recunoaștere a obiectelor (OR). întrucât tratamentul cu D-fenilalanină (D-phen) a crescut activitatea CA și a potențat memoria OR ca urmare a activării kinazei reglate de semnal extracelular (ERK) (31.32). În conformitate cu aceste rezultate, inhibarea CA a afectat, de asemenea, consolidarea memoriei fricii la șobolani prin inhibarea fosforilării ERK (33). Prin urmare. este de imaginat că CA sunt implicate și în memoria stingerii fricii.

Scheila Daiane Schmidt, Alessia Costa,Barbara Ranib, Eduarda Godfried Nachtigall, Maria Beatrice PassaniP,Fabrizio Carta, Alessio Nocentini, Jociane de Carvalho Myskiwd, Cristiane Regina Guerino Furinid, Claudiu T. Supuran, lvan lzquierdo, Patrizio Blandvensi, and Gustavo Blandvensi

Centrul de memorie, Institutul creierului din Ro Grande do Sul, Universitatea Pontificală Catolică din Rio Grande do Sul Porto Alegre 90619-900. Brazilia Departamentul de Științe ale Sănătății Universitatea din Florența, 50121 Horence, Ital; Departamentul de Neuroștiință, Psihologie, Cercetare în Droguri și Sănătatea Copilului, Universitatea din Florența, 50121 Florența, Italia; și „Institutul Național de Neuroștiință Translațională (INNT), Consiliul Național de Cercetare din Brazilia, Universitatea Federală din Rio de Janeiro, Rio de Janeiro 21941-902, Brazilia

Prezentul studiu a fost conceput special pentru a aborda această întrebare la șobolani folosind condiționarea fricii contextuale (CFC), o paradigmă de învățare asociativă care a contribuit în mare măsură la înțelegerea proceselor de extincție (34). Activitatea CA a fost modulată farmacologic cu inhibitori și activatori ai enzimelor care au fost administrate sistemic sau local în zonele creierului implicate înmemoria stingerii. Expresia c-Fos a fost de asemenea evaluată în aceste regiuni ale creierului după testul de retenție. Rezultatele indică faptul că modularea CA în regiuni ale creierului selectate afectează consolidarea friciimemoria stingerii. Acesta poate reprezenta un mecanism neexplorat anterior pentru a dezvolta medicamente pentru tratamentul îmbunătățit al bolilor mintale.

Rezultate

Efectul administrării sistemice a inhibitorilor CA asupra memoriei de stingere a fricii.

Designul experimental este prezentat în Fig.LA. La 24 de ore după antrenamentul CFC, animalele au fost expuse la o sesiune de antrenament de extincție de 30-min, urmată imediat de administrarea ip de ACTZ (10 mg/kg sau 30 mg/kg) sau 1-N-({4-sulfamofenv-etil)-2,4,6-perclorat de trimetilpiridiniu (C18; 30 mg/kg). Martorii au primit injecții comparabile la vehicule. Deoarece extincția este în esență o nouă învățare, tratamentul aplicat după sesiunea de instruire pentru extincție va afecta consolidarea, dar nu și achiziția (35). Un test de reținere 3-min a fost efectuat la 24 de ore după sesiunea de extincție: rezultatele sunt afișate în Fig. 1B. Am observat că înghețarea s-a stins pe parcursul sesiunilor de extincție, așa cum este indicat de o scădere a timpului de înghețare în ultimele 3 minute (27-30) în comparație cu primele 3 minute (0-3) (Fig 1B). Acesta este un indiciu clar că toți șobolanii au învățat dispariția CFC. Mai mult decât atât, memoria de extincție a durat cel puțin 24 de ore, deoarece șobolanii cărora li s-a administrat vehiculul au petrecut semnificativ mai puțin timp înghețând în testul de retenție decât în ​​intervalul inițial de 3-min (0-3) al sesiunii de extincție (Fig.1B) . Cu toate acestea, comportamentul de îngheț afișat la testul de retenție de către șobolanii injectați cu 30 mg/kg de ACTZ nu a diferit semnificativ de cel exprimat în primele 3 minute (0-3) ale sesiunii de extincție (Fig. 1B), dezvăluind că ACTZ la această doză a afectat consolidarea dispariției CFC. În consecință, șobolanii injectați cu 30 mg/kg de ACTZ au petrecut semnificativ mai mult timp înghețând decât toate celelalte grupuri de șobolani în testul de retenție (Fig.1B).

Comportamentul la îngheț nu a fost afectat de modificări ale locomoției, deoarece nu s-a detectat o diferență semnificativă la nivelul motorului general, activitate care a fost detectată comparând animalele tratate cu vehicul cu cele cărora li sa administrat 30 mg/kg de ACTZ sau C18 (SIAppendix, Fig S2), în acord cu rapoartele anterioare de la laboratoarele noastre și alte laboratoare (32,33). ACTZ la o doză mai mică (10 mg/kg) sau C18 nu a afectat consolidarea extincției CFC, deoarece șobolanii cărora li sa administrat ACTZ 10 mg/kg sau C18 au petrecut semnificativ mai puțin timp înghețând în testul de retenție decât în ​​primele 3 minute ({{ 11}}) al sesiunii de extincție (Fig.1B).C18 este un inhibitor de CA care, spre deosebire de ACTZ, nu traversează bariera hemato-encefalică (36). Prin urmare. inhibarea activității periferice CA provocată de C18 a lăsat intactă consolidarea extincției CFC.

Extincția CFC potențiată p-Phen.

Am testat efectele activării CA asupra extincției CFC prin administrarea de D-phen, un activator al mai multor izoforme CA (37). D-phen (300 mg/kg IP.) nu a influențat locomoția (Anexa SI, Fig. S2). Designul experimental este prezentat în Fig. 24. La 24 de ore după antrenament CFC, animalele au fost expuse la o sesiune de antrenament de extincție de 15-min, urmată imediat de administrarea IP de D-phen (300 mg/kg) cu sau fără ACTZ (30 mg/kg). Comenzile au primit injecții comparabile ale vehiculelor.

Pentru a evalua un efect de potențare, a fost indus un protocol de extincție mai slab prin scurtarea sesiunii de extincție la 15 minute. conform studiilor anterioare(38). Rezultatele sunt prezentate în Fig. 2B. Șobolanii tratați cu vehicule nu au prezentat diferențe semnificative în ceea ce privește durata de înghețare în primele (0-3) și finale (12-15) 3 minute ale sesiunii de extincție sau în testul de retenție (Fig.2B). În schimb, șobolanii tratați cu D-phen au petrecut semnificativ mai puțin timp înghețând decât șobolanii tratați cu vehicul în testul de retenție (Fig. 2B). Ei au demonstrat, de asemenea, un comportament de îngheț semnificativ mai mic în testul de retenție decât în ​​timpul inițialelor 3 minute(0-3) sau ultimelor 3 minute(12-15) ale sesiunii de antrenament pentru extincție (Fig. 2B). Astfel, administrarea de D-phen la 300 mg/kg a îmbunătățit memoria de extincție, deoarece o sesiune scurtă de extincție care în mod normal nu produce memorie de extincție pe termen lung a fost eficientă.

Pentru a evalua dacă învățarea îmbunătățită la șobolanii tratați cu D-phen poate depinde de activarea CA, am testat efectele ACTZ (30 mg/kg IP.) asupra efectelor procognitive provocate de 300 mg/kg D-phen (Fig. 2B). ). Șobolanii din acest grup au primit atât D-phen, cât și ACTZ prin IP separat. injecţii la sfârşitul sesiunii de antrenament de extincţie (Fig.24). Acești șobolani nu au diferit semnificativ în ceea ce privește timpul de înghețare în testul de retenție sau în 3 minute inițiale (0-3) ​​și finale (12-15) ale sesiunii de extincție. Mai mult, timpul de congelare la retenție nu a fost semnificativ diferit de cel al animalelor tratate cu vehicul (Fig.2B). Șobolanii tratați cu D-phen/ACTZ au petrecut semnificativ mai mult timp înghețând decât șobolanii cărora li sa administrat D-phen singur (Fig. 2B). Prin urmare, inhibarea CA a abolit îmbunătățirea memoriei de extincție provocată de D-phen.

Efectul administrării locale ACT în regiuni ale creierului selectate asupra extincției CEC. Apoi am întrebat dacă infuziile locale de ACTZ în cortexul prefrontal ventromedial (vmPFC), amigdala bazolaterală (BLA). regiunea CA1 a hipocampului dorsal (CA1) sau substanța nigra pars compacta (SNpc) au afectat extincția CFC. Toate animalele, distribuite în patru subseturi experimentale în funcție de regiunea creierului investigată, au fost supuse unei sesiuni de antrenament CFC și, 24 de ore mai târziu, unei sesiuni de antrenament de extincție de 30-min. urmată imediat de perfuzii bilaterale de ACTZ (10 nmol/lateral) sau vehicul în zone separate ale creierului (Fig.3A). Un test de retenție de 3-min a fost efectuat la 24 de ore după sesiunea de stingere (Fig 3A4). Efectele perfuziei medicamentului în vmPFC sunt prezentate în Fig. 3B.

Înghețul s-a stins pe tot parcursul sesiunii de extincție la ambele grupuri de animale, deoarece durata sa în ultimele 3 minute (27-30) a fost semnificativ mai scurtă decât cea din primele 3 minute (0-3) (Fig. 3B). Memoria de stingere a durat cel puțin 24 de ore de la testul de retenție. șobolanii tratați cu vehicul au prezentat un comportament de îngheț semnificativ redus în comparație cu cel observat în primele 3 minute (0-3) ​​ale sesiunii de extincție (Fig.3B). Cu toate acestea, timpul de înghețare al șobolanilor infuzați cu ACTZ în testul de retenție a fost semnificativ mai lung decât cel din ultimele 3 minute (27-30) ale sesiunii de antrenament pentru extincție (Fig. 3B). Mai mult, în testul de retenție, șobolanii tratați cu ACIZ au înghețat pentru o perioadă semnificativ mai lungă decât șobolanii tratați cu vehicul (Fig. 3B).

Efectele infuziei de ACTZ în BLA sunt prezentate în Fig.3C. Toate animalele au învățat dispariția deoarece durata înghețului în ultimele 3 minute (27-30) a fost semnificativ mai scurtă decât cea din primele 3 minute (0-3 )a sesiunii de stingere (Fig, 3C). Memoria de extincție a fost de lungă durată. deoarece șobolanii tratați cu vehicul au prezentat un comportament de îngheț semnificativ redus în testul de retenție decât în ​​primele 3 minute (0-3) ale sesiunii de antrenament pentru extincție (Fig, 3C), dimpotrivă, șobolanii care au primit ACTZinfuzie în BLA au prezentat o perioadă semnificativ mai lungă. timpul de îngheț în testul de retenție decât în ​​ultimele 3 minute (27-30) ale sesiunii de antrenament pentru extincție (Fig. 3C). Mai mult, comportamentul de îngheț a fost semnificativ mai lung la acești șobolani în comparație cu șobolanii tratați cu vehicul în testul de retenție.

Fig. 3D arată efectele ACTZinfuziei în regiunea CA1 hipocampală. Înghețarea a fost stinsă la ambele grupuri de animale pe parcursul sesiunii de extincție, cu o durată semnificativ scăzută în ultimele 3 minute (27-30) comparativ cu primele 3 minute (0-3) (Fig. 3D). În testul de retenție, șobolanii tratați cu vehicul au prezentat un timp de îngheț semnificativ mai scurt în comparație cu cel observat în timpul inițialelor 3 minute (0-3) ale sesiunii de antrenament pentru extincție: totuși. Șobolanii infuzați cu ACTZ au avut un timp de înghețare semnificativ mai lung în testul de retenție decât în ​​ultimele 3 minute (27-30) ale sesiunii de extincție (Fig. 3D). În plus, șobolanii infuzați cu ACTZ au prezentat o înghețare semnificativ mai lungă. timp decât șobolanii tratați cu vehicul în testul de retenție (Fig. 3D). Efectele perfuziei ACTZ în SNpc sunt prezentate în Fig. 3E. Înghețarea a fost stinsă pe toată durata sesiunii de antrenament pentru extincție în ambele grupuri experimentale, cu o scădere semnificativă a duratei în intervalul final (27-30)3-min, comparativ cu (0-3){{21 }}min interval (Fig. 3E). În testul de retenție, timpul de înghețare nu a diferit între șobolanii tratați cu vehicul și ACTZ, dar a fost semnificativ mai scurt decât cel observat în primele 3 minute(0-3) ale sesiunii de antrenament pentru extincție (Fig. 3E). ). Luate împreună, aceste constatări sugerează că inactivarea CA în vmPFC, BLA și CA1. dar nu și în SNpc, a afectat consolidarea extincției CFC.

Efectul administrării locale de p-Phen în regiuni ale creierului selectate asupra extincției CFC.

Pentru a susține în continuare observația că inactivarea CA prin administrarea ACTZ în vmPFC, BLA și CAl, dar nu în SNpc, a slăbit consolidarea tincțiunii CFCex, am testat dacă activarea CA în aceleași regiuni a condus la rezultate opuse. Designul experimental este prezentat în Fig.4A. Toate animalele, distribuite în patru subseturi experimentale în funcție de regiunea creierului investigată, au fost supuse unui antrenament CFC și.24 h mai târziu, o sesiune de antrenament de extincție de 15-min, urmată imediat de perfuzii bilaterale de p-phen (50 nmol). /side) sau vehicul în regiuni separate ale creierului. Pentru a evalua un efect de potențare, sesiunea de extincție a fost scurtată la 15 minute pentru a induce o extincție mai slabă. conform studiului de față și studiilor anterioare (38). Efectele perfuziei medicamentului în vmPFC sunt prezentate în Fig. 4B.

Comparația dintre 3-minul inițial (0-3) cu ultimele 3-min (12-15) de îngheț a arătat că înghețul s-a stins pe parcursul unei sesiuni de stingere de 15-min în șobolani tratați atât cu vehicule cât și cu D-phen; cu toate acestea, efectul a fost de scurtă durată, deoarece timpul de înghețare al șobolanilor tratați cu vehicul nu a diferit semnificativ între primele 3 minute (0-3) ale sesiunii de extincție și în testul de retenție (Fig. 4B). În testul de retenție, șobolanii cărora li sa administrat D-phen au petrecut semnificativ mai puțin timp înghețând în comparație cu șobolanii tratați cu vehicul (Fig. 4B). În plus, timpul de congelare al animalelor tratate cu D-phen a fost semnificativ mai scurt în testul de retenție decât în ​​timpul primelor 3 minute (0-3) ale sesiunii de antrenament pentru extincție (Fig. 4B). Efectele infuziei cu D-phen în BLA sunt afișate în Fig. 4C. Înghețul s-a stins pe tot parcursul sesiunii de stingere, deoarece durata sa în ultimele 3 minute (12-15) a fost semnificativ mai scurtă decât cea a 3-minului inițial (0-3) atât în ​​vehicul, cât și în D- șobolani tratați cu phen (Fig. 4C). Cu toate acestea, în testul de retenție, comportamentul la îngheț al șobolanilor tratați cu vehicul nu a fost semnificativ diferit de cel prezentat în primele 3 minute (0-3) ale sesiunii de extincție, ceea ce indică faptul că învățarea extincției a fost de scurtă durată (Fig. 4C). În schimb, șobolanii care au primit D-phen au prezentat un timp de înghețare semnificativ mai scurt în testul de retenție decât în ​​timpul primelor 3 minute (0-3) ale sesiunii de extincție (Fig. 4C). Mai mult, în testul de retenție, șobolanii tratați cu D-phen au petrecut semnificativ mai puțin timp înghețând în comparație cu șobolanii tratați cu vehicul (Fig. 4C). Fig. 4D prezintă efectele infuziei cu D-phen în regiunea CA1 hipocampală.

Extincția a avut loc la toți șobolanii, deoarece durata înghețului în timpul sesiunii de extincție a scăzut semnificativ în ultimele 3 minute (12-15) în comparație cu primele 3 minute (0-3) (Fig. 4D). dar aceasta nu a fost lungă. -de durată, deoarece timpul de înghețare al șobolanilor tratați cu vehicul nu a fost semnificativ diferit între primele 3 minute (0-3) ​​ale sesiunii de extincție și în testul de retenție (Fig.4D). Șobolanii tratați cu D-phen au prezentat un timp de înghețare semnificativ mai scurt în testul de retenție decât în ​​timpul primelor 3 minute (0-3) ale sesiunii de extincție (Fig. 4D). Timpul de înghețare în testul de retenție a fost semnificativ mai scurt la șobolanii cărora li s-a administrat D-phen, comparativ cu șobolanii tratați cu vehicul (Fig. 4D).

Efectele infuziei D-phen în SNpc sunt prezentate în Fig. 4E. Înghețarea a fost stinsă pe toată durata sesiunii de antrenament pentru extincție, cu o durată semnificativ scăzută în ultimele 3 minute(12-15)comparativ cu primele 3 minute(0-3). Timpii de înghețare ai șobolanilor tratați cu vehicul și D-phen nu au diferit semnificativ în testul de retenție și nu au diferit semnificativ de cei observați în primele 3 minute (0-3) ale sesiunii de extincție (Fig. 4E). Luate împreună, aceste constatări sugerează că activarea CA în vmPFC, BLA și CAl, dar nu în SNpc, a potențat consolidarea extincției CFC.

Administrarea sistemică ACTZ Expresia c-Fos modulată în cortexul prefrontal ventromedial. Șobolanii au fost antrenați în CFC și 24 de ore mai târziu au fost expuși la o sesiune de antrenament de extincție de 30-min, urmată imediat de administrarea ip de ACTZ (30 mg/kg) sau vehicul. Șobolanii au fost eutanasiați la 90 de minute după testul de retenție (Fig. 5A). În conformitate cu rezultatele prezentate în Fig. 1B. toți șobolanii au învățat extincția CFC, care a durat cel puțin 24 de ore (Anexa SI, Fig. S1); totuși, la șobolanii cărora li s-a injectat 30 mg/kg de ACTZ comportamentul de îngheț manifestat în testul de retenție nu a diferit semnificativ de cel exprimat în primele 3 minute (0-3) ale sesiunii de antrenament pentru extincție (Anexa SI. Fig. S1).confirmând că ACTZ la această doză a afectat consolidarea dispariţiei CFC. Am constatat că expresia c-Fos în vmPFC a fost semnificativ mai mare la șobolanii cărora li sa administrat ACTZ în comparație cu șobolanii tratați cu vehicul (Fig. 5C), în timp ce nu s-au găsit diferențe în expresia c-Fos în BLA.CA1.sau SNpc la șobolanii tratați. cu ACTZ și cele tratate cu vehicul (Anexa SI, Fig. S3).

Discuţie

Recuperarea spontană a amintirilor de frică poate apărea în orice moment și declanșează multă suferință pentru persoanele afectate de tulburări bazate pe frică, cum ar fi PTSD, anxietatea generalizată și fobiile. Tratamentul recomandat pentru aceste tulburări este terapia de expunere (39), în timpul căreia amintirile de dispariție depășesc memoria originală a fricii. Cu toate acestea, terapia de expunere nu este întotdeauna eficientă, iar frica inițială recidivează adesea spontan după dispariție. sugerând că extincția formează o nouă memorie care inhibă sau concurează cu frica originală, dar nu o șterge (34, 40). Prin urmare. sunt necesare intervenții noi care pot crește extincția și învățarea inhibitorie. Pe lângă metodele comportamentale implementate în timpul psihoterapiei și tehnicile de stimulare bazate pe dispozitive care îmbunătățesc sau reduc activitatea în diferite regiuni ale creierului, există, de asemenea, un sprijin din ce în ce mai mare pentru medicamentele noi care pot crește extincția și învățarea inhibitorie. în special atunci când este combinată cu psihoterapia bazată pe expunere (41-43). Este nevoie de investigații suplimentare ale proceselor de extincție pentru a identifica ținte pentru aceste medicamente noi.

Aici am examinat rolul CA în memoria de stingere a fricii la șobolani prin evaluarea efectelor sistemice a doi inhibitori CA, ACTZ(31) și C18(37) și a unui activator CA, D-phen (38). Am descoperit că CA din creier sunt implicate în mecanismele de stingere a fricii. Administrarea ACTZ(30 mg/kg IP.) dar nu și a C18.un compus care nu pătrunde în creier, imediat după ședința de extincție a afectat consolidarea memoriei de stingere a fricii. Este larg acceptat că dispariția unui răspuns comportamental necesită o nouă învățare inhibitorie (5,34,44). Rezultatele noastre sunt în acord cu dovezile anterioare care sugerează că activitatea CA a creierului este necesară pentru formarea de noi memorie, deoarece inactivarea CA a creierului afectează formarea memoriei spațiale și a fricii (28, 33). În conformitate cu aceste constatări, șoarecii cu deficit genetic în Izoforma CAIX expusă la testul labirintului de apă Morris a avut mai multe dificultăți decât tovarășii lor de tip sălbatic în a învăța să găsească platforma ascunsă (30). Mai recent, grupul nostru de cercetare a raportat că administrarea sistemică de ACTZ la șoareci masculi CD1 a provocat amnezie în testul de recunoaștere a obiectelor (32). Un efect dăunător asupra cogniției de către ACTZ a fost raportat și la oameni. ca un studiu randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo a arătat că acest inhibitor de CA a afectat performanța cognitivă, funcția executivă, memoria pe termen scurt și atenția susținută în timpul expunerii acute la mare altitudine (45).

Am raportat anterior că administrarea sistemică de ACTZ (30 mg/kg ip) a scăzut semnificativ activitatea CA în creierul șoarecelui (32). In prezent studiez. ACIZ a provocat amnezie la aceeași doză utilizată în munca noastră anterioară; prin urmare, este de imaginat că afectarea memoriei de extincție a avut loc ca o consecință a inhibiției CA. Astfel, creșterea activității CA ar fi de așteptat să îmbunătățească memoria de extincție. Rezultatele noastre susțin această idee; administrarea de D-phen, un activator CA, a produs o memorie de lungă durată a stingerii fricii atunci când este administrată imediat după sesiunea de extincție. În consecință, administrarea de D-phen la șoarecii CD1 a îmbunătățit memoria în testul OR și a crescut activitatea CA a creierului (32). Administrarea concomitentă de ACTZ a blocat complet îmbunătățirea memoriei determinate de p-phen atât în ​​studiul de față, cât și în studiul anterior (32), indicând în mod clar un rol critic al activării CA ca mecanism de bază și excluzând posibilele contribuții ale altor efecte ale D-phen, cum ar fi facilitarea sintezei și/sau transmiterii neurotransmițătorilor aminergici (32).

Folosind administrarea locală de ACTZ sau D-phen în regiuni discrete ale creierului, prezentul studiu demonstrează că CA au un rol critic în consolidarea memoriei de extincție în vmPFC. BLA.și CA1. Toate aceste regiuni sunt implicate în dispariția memoriei, așa cum arată studiile care utilizează tehnici variind de la leziuni tisulare până la abordări farmacologice, optogenetice și chimio-genetice (22,46). În schimb, CA din SNpc nu sunt implicate în acest proces, cel puțin nu în condițiile experimentale explorate în studiul de față. Studiul nostru demonstrează fără echivoc că activarea CA în aceste regiuni ale creierului este necesară pentru a asigura consolidarea memoriei de extincție. Circuitele neuronale care angajează vmPFC, BLA și CAl au fost, de asemenea, implicate în achiziționarea, consolidarea și recuperarea memoriei fricii (34). Deși procesele mnemonice pentru consolidarea și extincția memoriei fricii au în comun unele mecanisme și căi moleculare similare (34), modelele de activare neuronală și mecanismele de transducție a semnalului neuronal în circuitele de consolidare și extincție a fricii arată diferențe marcate (13.22. 47). Aceste diferențe ar putea fi conferite de diferențe procedurale în ceea ce privește prezența sau absența stimulului necondiționat.

În timpul condiționării fricii, circuitele creierului sunt activate prin expunerea animalelor atât la un stimul necondiționat (șoc), cât și la un stimul condiționat (în cazul nostru, contextul), în timp ce stingerea fricii este indusă prezentând doar stimulul condiționat. Mai multe proteine ​​kinaze (Fyn, CDK5. PKA. și PKC), proteine ​​​​fosfataze (calcineurină și SHP1/2), factori de transcripție și gene timpurii imediate (CARP. CREB.c-Fos, c-Jun. JunB. și iunie) vin în joc în timpul condiționării sau dispariției fricii, fiind fie crescute, fie diminuate în diverse moduri (revizuit în ref.47). Deteriorarea atât a consolidării memoriei (33) cât și a dispariției temerilor (studiul de față) pare să fie asociată cu o activitate redusă a CA a creierului. Creierul este bogat în diferite izoforme CA, distribuite diferențiat în diferite regiuni ale creierului (26). Deoarece ACTZ este un inhibitor neselectiv al mai multor dintre aceste izoforme, efectul său poate masca contribuții distincte ale diferitelor izoforme(48) și implicarea specifică a anumitor zone ale creierului (vezi mai jos).

Descoperirile din mai multe studii care se concentrează pe rolul meu PFC în extincție indică faptul că neuronii acestei regiuni sunt necesari pentru învățarea extincției (12). În special, stimularea scurtă a cortexului infralimbic (o subregiune a vmPFC) reduce memoria fricii și întărește extincția (12. 49). Mai recent, s-a descoperit că administrarea sistemică de ACTZ inhibă declanșarea unei unități corticale prefrontale in vivo, ceea ce duce la reducerea activității neuronale bazale a cortexului prefrontal(50). Luate împreună, aceste descoperiri sugerează că ACTZ afectează memoria stingerii fricii prin inhibarea declanșării vmPFC.

La 90 de minute după testul de retenție de extincție, nucleele cFos-imunopozitive au fost numeroase în vmPFC ale șobolanilor tratați cu ACTZ, semnificativ mai numeroși decât la șobolanii tratați cu vehicul. Cea mai parcimonioasă interpretare a rezultatelor noastre sugerează că șobolanii tratați cu ACTZ au prezentat niveluri ridicate de comportament de îngheț și un număr crescut de nuclee c-Fos-pozitive în vmPFC la retenție. întrucât nu au consolidat dispariția, ci mai degrabă și-au amintit de antrenamentul CFC administrat cu 48 de ore mai devreme. Intr-adevar. multe dovezi experimentale sugerează un rol cheie al PFC în procesarea și rememorarea amintirilor de frică contextuală la distanță (51, 52) și în timpul consolidării extincției, mai degrabă decât după un test de retenție (52-54). Imunocolorarea c-Fos în regiunea BLA și a hipocampului CA1 după recuperarea extincției a fost scăzută în creierul șobolanilor tratați cu vehicul și nu diferită semnificativ de cea din creierul șobolanilor tratați cu ACTZ. A fost descris un rol limitat în timp al neuronilor BLA și CA1 în recuperarea memoriei fricii (55), ceea ce ar putea explica de ce am detectat o imunocolorare foarte scăzută cu c-Fos la șobolani care nu au învățat dispariția (tratați cu ACTZ) și se presupune că și-au amintit experiența de antrenament. . În plus. o reglare bidirecțională a inducției c-Fos în mPFC (ridicat) și BLA (scăzut) a fost raportată în timpul antrenamentului de extincție și a recuperării spontane (56, 57); cu toate acestea, alte studii au găsit o expresie ridicată a c-Fos în BLA și CA1 după recuperarea extincției (54). Literatura care acoperă rolul hipocampului în amintirea fricii și în dispariția este vastă și destul de controversată (revizuită în ref.52). Orsini și colab. (58) nu au găsit nicio creștere semnificativă a expresiei c-Fos în hipocampul ventral al șobolanilor stinși, iar un alt studiu nu a găsit nicio creștere semnificativă a cFos în hipocampul dorsal la amintirea fricii contextuale la distanță de extincție (59). Mai mult, lucrările timpurii au sugerat că implicarea hipocampului dorsal în consolidarea contextuală este limitată la perioada timpurie a fazei de memorare (60). Studiile menționate mai sus au folosit protocoale diferite (de ex. extincție auditivă, sesiuni repetate de extincție pe parcursul mai multor zile), care pot fi parțial responsabile pentru aceste discrepanțe. Clar. sunt necesare lucrări suplimentare pentru a explora aceste rezultate controversate.

În concluzie, studiul de față oferă câteva perspective importante asupra implicării CA în memoria fricii. Am demonstrat că (i) inhibarea selectivă a CA din creier se corelează cu tulburările de extincție; () activarea selectivă a CA în creier are un efect benefic asupra dispariției; și (i) activitatea CA este implicată în modularea extincției numai în anumite regiuni ale creierului. Mecanismele care stau la baza efectelor CA asupra dispariției rămân în mare parte necunoscute. Prin inhibarea CA, ACTZ scade capacitatea de tamponare. influențând astfel pH-ul intracelular și extracelular și afectând proteinele, NMDA. și funcția receptorului acidului y-aminobutiric (GABA) (51). Inhibitorii CA cresc, de asemenea, acumularea intracelulară de CO. blochează transportul an-ionului și crește nivelul GABA. conducând la modularea ratei de tragere (61). Studiile timpurii au demonstrat că, în regiunea hipocampului CA1, activarea asociată a intrărilor multi-sinaptice pe neuronii piramidali transformă tranzitoriu potențialele postsinaptice inhibitoare GABAergice (IPSP) în potențiale postsinaptice excitatorii (62-64). Intrările sinaptice transformate de la interneuronii GABAergic oferă un mecanism pentru modularea fluxului de semnal prin rețeaua hipocampală, îmbunătățind raportul semnal-zgomot și amplificând selectiv greutățile sinaptice relevante pentru o anumită memorie (64). Această transformare sinaptică depinde de un flux de HCO3-transmembranar depolarizant care este redus sau eliminat de ACTZ(64). În plus, în prezența p-phen, intrările sub prag către neuronii piramidali au schimbat IPSP-urile mediate de GABA la răspunsuri depolarizante (65). Modificarea fluxului de informații prin rețeaua hipocampală poate explica efectele de afectare a memoriei ale ACTZ. Ieșirea hipocampului către mPFC ar fi, de asemenea, afectată de inhibitorii CA, deoarece s-a descoperit că ACTZ crește impulsul aferent de la hipocamp în timp ce reduce activitatea neuronală bazală a neuronilor cortexului prefrontal (50).

S-a raportat recent că ACTZ inhibă fosforilarea ERK indusă de condiționarea fricii în amigdală(33), în concordanță cu afectarea raportată a extincției (66. În acest sens, este important de reținut că administrarea de D-phen activează rapid. Căile ERK în cortex și hipocamp și pentru a îmbunătăți memoria OR (32) și performanța labirintului de apă (29).

Stingerea răspunsurilor nedorite, atunci când sunt expuse la mementouri ale traumei anterioare, este un proces de bază care stă la baza terapiei de expunere. Medicamentele sistemice care facilitează extincția, cum ar fi canabinoizii, noradrenergicele, medicamentele histaminergice și factorii neurotrofici, ar putea fi utile în îmbunătățirea răspunsului clinic al terapiilor bazate pe expunere (3.5.12). Pe baza rezultatelor acestui studiu, activatorii CA cerebrali (67), ca molecule capabile să îmbunătățească extincția, pot îmbunătăți tratamentul bazat pe expunere a unor astfel de tulburări precum fobiile, anxietatea și PISD. Potențialele clinice ale acestor compuși nu sunt diminuate de lipsa de cunoștințe despre mecanismul de bază, deși încercările de optimizare a utilizării lor vor avea o probabilitate mult mai mare de succes atunci când mecanismul lor de declanșare a atenuării fricii este înțeles.

Materiale și metode

Șobolanii Wistar masculi în vârstă de trei luni au fost achiziționați de la Chares River Lab-oratories Italia și găzduiți în grup în Centrul de Servicii pentru Adăpostirea Animalelor de Laborator (CeSAL), Universitatea din Florența. Condiționarea fricii a fost efectuată cu trei șocuri electrice de picior (0,5 mA 2s) la intervale de 30- s. Stingerea condiționării fricii contextuale a fost efectuată așa cum s-a descris anterior(38,68) cu puține modificări. Apoi, 24 de ore mai târziu, animalele au fost plasate în aceeași cameră pentru o sesiune de antrenament pentru extincție de 15- sau 30-min (în funcție de setul experimental) în absența șocurilor piciorului. Imediat după aceste sesiuni, vehiculul, activatorul CA (p-phen) sau inhibitorul CA (ACTZor C18) a fost administrat fie sistemic (ip), fie perfuzat local în regiuni selectate ale creierului prin canule implantate stereotaxic bilateral. Timpul pe care animalul a petrecut înghețarea a fost înregistrat manual de un observator instruit care nu cunoștea tratamentele. și diferențele semnificative statistic între grupurile experimentale au fost determinate cu măsurători repetate ANOVA în două sensuri. Sursa semnificației detectate a fost determinată folosind valorile P testului post-hoc cu comparație multiplă Bonferroni<0.05 were="" considered="" statistically="" significant.="" detail="" of="" statistical="" analysis="" is="" provided="" in="" s/appendix,="" table="">

Pentru măsurătorile c-Fos, șobolanii au fost antrenați în sarcina CFC și după 24 de ore au fost supuși unui antrenament de extincție de 30-min. Imediat după această sesiune, au primit o IP.injecție a unui vehicul sau ACTZ 30 mg. Un test de retenție de 3-min a fost efectuat la 24 de ore după sesiunea de antrenament pentru extincție. Șobolanii au fost eutanasiați la 90 de minute după testul de retenție și apoi perfuzați transcardial cu alnă fiziologică rece. a urmat b 4 la sută (paraformaldehidă valvulară în tampon fosfat 0,1 M (pH 7,4). Prepararea țesuturilor, imunocolorarea. și analiza au fost efectuate așa cum s-a descris anterior (69). Testul t al studentului a fost utilizat pentru a compara numărul de c-Fo{{{ 15}}nuclee pozitive între diferite grupuri experimentale.

Detalii despre protocolul de studiu și o listă de materiale sunt disponibile în S/Anexă. Datele brute care susțin concluziile acestui studiu sunt furnizate în Setul de date S1. Solicitările de informații suplimentare trebuie adresate autorilor corespunzători.

Referinţă

1. JL McGaugh, Making lasting memories: Remembering the significant. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 110 (suppl. 2), 10402–10407 (2013).

2. CM Tyng, HU Amin, MNM Saad, AS Malik, The influences of emotion on learning and memory. Față. Psih. 8, 1454 (2017).

3. G. Provensi, MB Passani, A. Costa, I. Izquierdo, P. Blandina, Neuronal histamine and the memory of emotional important events. Br. J. Pharmacol. 177, 557–569 (2020).

4. MS Fanselow, Rolul învățării în iminența amenințărilor și comportamentele defensive. Curr. Opinează. Comportament. Sci. 24, 44–49 (2018).

5. C. Furini, J. Myskiw, I. Izquierdo, The learning of fear extinction. Neurosci. Biocomportament. Apoc. 47, 670–683 (2014).

6. JE LeDoux, Circuitele emoționale în creier. Annu. Pr. Neurosci. 23, 155–184 (2000).

7. RM Visser, A. Lau-Zhu, RN Henson, EA Holmes, Sisteme de memorie multiple, momente multiple: cum știința poate informa tratamentul pentru a controla expresia amintirilor emoționale nedorite. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 373, 20170209 (2018).

8. T. Abel, KM Lattal, Mecanismele moleculare de achiziție, consolidare și regăsire a memoriei. Curr. Opinează. Neurobiol. 11, 180–187 (2001).

9. NC Tronson, JR Taylor, Mecanismele moleculare ale reconsolidării memoriei. Nat. Pr. Neurosci. 8, 262–275 (2007).

10. B. Jones, E. Bukoski, L. Nadel, JM Fellous, Remaking memories: Reconsolidation updates positively motivated spatial memory in rats. Învăța. Mem. 19, 91–98 (2012).

11. C. Bucherelli, E. Baldi, C. Mariottini, MB Passani, P. Blandina, Reactivarea aversivă a memoriei angajează în amigdala doar unii neurotransmițători implicați în consolidare. Învăța. Mem. 13, 426–430 (2006).

12. MR Milad, GJ Quirk, Extincția fricii ca model pentru neuroștiința translațională: Zece ani de progres. Annu. Rev. Psihol. 63, 129–151 (2012).

13. DW Bloodgood, JA Sugam, A. Holmes, TL Kash, Extincția fricii necesită proiecții ale cortexului infralimbic către amigdala bazolaterală. Transl. Psihiatrie 8, 60 (2018).

14. O. Bukalo, CR Pinard, A. Holmes, Mecanisme la medicamente: Elucidarea substraturilor neuronale și moleculare ale extincției fricii pentru a identifica noi tratamente pentru tulburările de anxietate. Br. J. Pharmacol. 171, 4690–4718 (2014).

15. MG Craske, D. Hermans, B. Vervliet, Direcții de ultimă oră și viitoare pentru extincție ca model translațional pentru frică și anxietate. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 373, 20170025 (2018).

16. BM Graham, MR Milad, Studiul extincției fricii: Implicații pentru tulburările de anxietate. A.m. J. Psychiatry 168, 1255–1265 (2011).

17. JS Abramowitz, Practica terapiei prin expunere: relevanța teoriei cognitiv-comportamentale și a teoriei extincției. Comportament. Acolo. 44, 548–558 (2013).

18. MB Powers, JM Halpern, MP Ferenschak, SJ Gillihan, EB Foa, O revizuire meta-analitică a expunerii prelungite pentru tulburarea de stres posttraumatic. Clin. Psih. Apoc. 30, 635–641 (2010).

19. JC Myskiw, I. Izquierdo, CR Furini, Modulation of the extinction of fear learning. Brain Res. Taur. 105, 61–69 (2014).

20. G. Zhu și colab., ștergerea Calpain-1 afectează LTD dependentă de mGluR și dispariția memoriei fricii. Sci. Rep. 7, 42788 (2017).

21. IP Pavlov, „O investigație a activității fiziologice a cortexului cerebral” în Reflexe condiționate, GV Anrep, Ed. (Oxford University Press, Londra, Marea Britanie, 1927).

22. CA Orsini, S. Maren, Mecanismele neuronale și celulare ale fricii și formarea memoriei de extincție. Neurosci. Biocomportament. Apoc. 36, 1773–1802 (2012).

23. A. Garakani, SJ Mathew, DS Charney, Neurobiology of anxiety disorders and implications for treatment. Mt. Sinai J. Med. 73, 941–949 (2006).

24. L. Ledgerwood, R. Richardson, J. Cranney, D-cicloserina facilitează extincția fricii învățate: Efecte asupra redobării și extincție generalizată. Biol. Psihiatrie 57, 841–847 (2005).

25. P. Busquet, A. Hetzenauer, MJ Sinnegger-Brauns, J. Striessnig, N. Singewald, Role of L-type Ca2 plus channel isoforms in the extinction of conditioned fria. Învăța. Mem. 15, 378–386 (2008).

26. CT Supuran, A. Scozzafava, Carbonic anhydrases as targets for medicinal chemistry. Bioorg. Med. Chim. 15, 4336–4350 (2007).

27. A. Waheed, WS Sly, Anhidraza carbonică XII funcţionează în sănătate şi boală. Gene 623, 33–40 (2017).

28. MK Sun, DL Alkon, Anhidraza carbonică atragerea atenției: Terapia memoriei și îmbunătățirea. Trends Pharmacol. Sci. 23, 83–89 (2002).

29. MK Sun, DL Alkon, Îmbunătățirea farmacologică a eficacității sinaptice, învățarea spațială și memoria prin activarea anhidrazei carbonice la șobolani. J. Pharmacol. Exp. Acolo. 297, 961–967 (2001).

30. PW Pan și colab., Fenotipul creierului de șoareci cu deficiență de anhidrază carbonică IX. Transgenic Res. 21, 163–176 (2012).

31. L. Canto de Souza și colab., Activarea anhidrazei carbonice îmbunătățește memoria de recunoaștere a obiectelor la șoareci prin fosforilarea kinazei reglate de semnal extracelular în cortex și hipocamp. Neurofarmacologie 118, 148–156 (2017).

32. TH Maren, Efectele farmacologice și renale ale Diamox (6063), un nou inhibitor al anhidrazei carbonice. Trans. NY Acad. Sci. 15, 53 (1952).

33. MT Yang, WL Chien, DH Lu, HC Liou, WM Fu, Acetazolamida afectează consolidarea memoriei fricii la rozătoare. Neuropharmacology 67, 412–418 (2013).

34. I. Izquierdo, CR Furini, JC Myskiw, Memoria fricii. Physiol. Apoc. 96, 695–750 (2016).

35. E. Baldi, C. Bucherelli, Brain sites implicate in fear memory reconsolidation and extinction of rozatoare. Neurosci. Biocomportament. Apoc. 53, 160–190 (2015).

36. V. Menchise și colab., Inhibitori de anhidrază carbonică: Stacking with Phe131 determină regiunea activă de legare a inhibitorilor așa cum este exemplificată de structura cristalină de raze X a unei sulfonamide antitumorale impermeabile la membrană complexată cu izoenzima II. J. Med. Chim. 48, 5721–5727 (2005).

37. C. Temperini, A. Scozzafava, D. Vullo, CT Supuran, Carbonic anhydrase activators. Activarea izoformelor I, II, IV, VA, VII și XIV cu L- și D-fenilalanină și analiza cristalografică a aductilor acestora cu izoenzima II: recunoașterea stereospecifică în situsul activ al unei enzime și consecințele acesteia pentru proiectarea medicamentului. J. Med. Chim. 49, 3019–3027 (2006).

38. J. de Carvalho Myskiw, F. Benetti, I. Izquierdo, Behavioral tagging of extinction learning. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 110, 1071–1076 (2013).

39. WW Eaton, OJ Bienvenu, B. Miloyan, Specific phobias. Lancet Psychiatry 5, 678–686 (2018).

40. B. Vervliet, MG Craske, D. Hermans, Fear extinction and relapse: State of the art. Annu. Rev. Clin. Psih. 9, 215–248 (2013).

41. JS Weisman, TL Rodebaugh, Exposure therapy augmentation: O revizuire și extindere a tehnicilor informate de o abordare de învățare inhibitorie. Clin. Psih. Apoc. 59, 41–51 (2018).

42. EN Cahill, AL Milton, Mecanisme neurochimice și moleculare care stau la baza efectului de recuperare-extincție. Psychopharmacology (Berl.) 236, 111–132 (2019).

43. LAM Lebois, AV Seligowski, JD Wolff, SB Hill, KJ Ressler, Augmentation of extinction and inhibitory learning in anxiety and trauma-related disorders. Annu. Rev. Clin. Psih. 15, 257–284 (2019).

44. JE Dunsmoor, VD Campese, AO Ceceli, JE LeDoux, EA Phelps, Novelty facilitated extinction: Furnizarea unui rezultat nou în locul unei amenințări așteptate diminuează recuperarea răspunsurilor defensive. Biol. Psihiatrie 78, 203–209 (2015).

45. J. Wang și colab., Efectele acetazolamidei asupra performanței cognitive în timpul expunerii la mare altitudine. Neurotoxicol. Teratol. 35, 28–33 (2013).

46. ​​N. Singewald, A. Holmes, Rodent Models of impaired fear extinction. Psychophar mycology (Berl.) 236, 21–32 (2019).

47. NC Tronson, KA Corcoran, V. Jovasevic, J. Radulovic, Fear conditioning, and extinction: Emotional states encoded by distinct signaling pathways. Tendințe Neurosci. 35, 145–155 (2012).

48. CT Supuran, Aplicații ale inhibitorilor anhidrazelor carbonice în bolile renale și ale sistemului nervos central. Opinia expertului. Acolo. Pat. 28, 713–721 (2018).

49. MR Milad, GJ Quirk, Neurons in medial prefrontal cortex signal memory for fear extinction. Nature 420, 70–74 (2002).

50. LS Bueno-Junior și colab., Acetazolamida potențează impulsul aferent către cortexul prefrontal in vivo. Physiol. Rep. 5, e13066 (2017).

51. PW Frankland, B. Bontempi, LE Talton, L. Kaczmarek, AJ Silva, The implication of the anterior cingulate cortex in remote contextual fear memory. Science 304, 881–883 (2004).

52. FH Do Monte, GJ Quirk, B. Li, MA Penzo, Recuperarea amintirilor fricii, pe măsură ce trece timpul... Mol. Psihiatrie 21, 1027–1036 (2016).

53. FH Do-Monte, G. Manzano-Nieves, K. Quiñones-Laracuente, L. Ramos-Medina, GJ Quirk, Revisiting the role of infralimbic cortex in fear extinction with optogenetics. J. Neurosci. 35, 3607–3615 (2015).

54. E. Knapska, S. Maren, Tipare reciproce ale expresiei c-Fos în cortexul prefrontal medial și amigdala după extincția și reînnoirea fricii condiționate. Învăța. Mem. 16, 486–493 (2009).

55. FH Do-Monte, K. Quiñones-Laracuente, GJ Quirk, A temporal shift in the circuits mediating retrieval of fear memory. Nature 519, 460–463 (2015).

56. C. Herry, N. Mons, Rezistența la extincție este asociată cu inducerea imediată precoce a genelor afectate în cortexul prefrontal medial și amigdala. EURO. J. Neurosci. 20, 781–790 (2004).

57. AC Huang, BC Shyu, S. Hsiao, TC Chen, AB He, substraturi neuronale ale condiționării fricii, extincției și recuperării spontane în învățarea prin evitarea pasivă: un studiu c-fos la șobolani. Comportament. Brain Res. 237, 23–31 (2013).

58. CA Orsini, JH Kim, E. Knapska, S. Maren, Hipocampal and prefrontal projections to the bazal amigdala mediate context regulation of friary after extinction. J. Neurosci. 31, 17269–17277 (2011).

59. BA Silva, AM Burns, J. Gräff, A cFos activation map of remote fear memory attenuation. Psychopharmacology (Berl.) 236, 369–381 (2019).

60. B. Sacchetti, CA Lorenzini, E. Baldi, G. Tassoni, C. Bucherelli, Talamusul auditiv, hipocampul dorsal, amigdala bazolaterală și rolul cortexului peririnal în consolidarea înghețului condiționat la context și a stimulului condiționat acustic la șobolan. J. Neurosci. 19, 9570–9578 (1999).

61. E. Wyllie, G. Cascino, B. Gidal, H. Goodkin, Tratamentul epilepsiei: principii și practică, (Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, PA, 2010).

62. KJ Staley, BL Soldo, WR Proctor, Mecanismele ionice ale excitației neuronale de către receptorii inhibitori GABAA. Science 269, 977–981 (1995).

63. MK Sun, TJ Nelson, DL Alkon, Comutarea funcțională a sinapselor GABAergice prin activarea receptorului de rianodină. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 97, 12300–12305 (2000).

64. M. Sun, D. Dahl, DL Alkon, Transformarea heterosinaptică a gatingului GABAergic în hipocamp și efectele inhibării anhidrazei carbonice. J. Pharmacol. Exp. Acolo. 296, 811–817 (2001).

65. MK Sun, WQ Zhao, TJ Nelson, DL Alkon, Theta rhythm of hipocampal CA1 neuron activity: Gate by GABAergic synaptical depolarization. J. Neurofiziol. 85, 269–279 (2001).

66. M. Cammarota et al., Recuperarea și extincția memoriei. Celulă. Mol. Neurobiol. 25, 465–474 (2005).

67. CT Supuran, Activatori ai anhidrazei carbonice. Viitorul Med. Chim. 10, 561–573 (2018). 68. SD Schmidt și colab., PACAP modulează consolidarea și stingerea condiționării fricii contextuale prin receptorii NMDA. Neurobiol. Învăța. Mem. 118, 120–124 (2015).

69. R. Fabbri și colab., Recuperarea memoriei evitării inhibitorii necesită activarea receptorului histaminei H1 în hipocamp. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 113, E2714–E2720 (2016).