Studiul privind mecanismul neuroprotector de Cistanche și Fomitopsis Pinicola pe mesencephalon neuroni dopaminergici induse de MPP +

Studiul privind mecanismul neuroprotector al Cistanche și Fomitopsis Pinicola pe neuronii dopaminergici mesencephala induse de MPP+

Contact:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Evidențiază

Fomitopsis Pinicola se caracterizează prin proprietăți anti-oxidante, anti-inflamație și imunostimulante. În studiul de față, culturi primare de celule dopaminergice preparate din mezentalala șoarece embrionar au fost utilizate pentru a determinaneuroprotectoareefectele și mecanismele potențiale ale extractului de apă de Fomitopsis Pinicola asupra degenerării neuronilor dopaminergici induse de MPP+. Rezultatele au demonstrat că extractul de apă de Fomitopsis Pinicola protejate neuroni dopaminergici împotriva MPP+. Extractul de apă din Fomitopsis Pinicola a prezentat activități antioxidante și antiinflamatorii. Mecanismulneuroprotectoareefectul extractului de apă de Fomitopsis Pinicola poate fi legat de inhibitor asupra stresului oxidativ mitocondrial. Studii recente au arătat căneuroprotectoareefectulCistancheîl face un "candidat ideal" pentru îmbunătățirea bolilor neurologice.Cistancheeste bogat în echinacozide. Extractul decistanchesa dovedit a induce sinteza factorului de creștere a nervilor in vivo și experimente in vitro, promova secretia de factori înrudiți în creier, și de a îmbunătăți o serie de funcții ale creierului legate de memorie.

CistancheAneuroprotectoareEfecte

Abstract

Obiectiv: Pentru a observaneuroprotectoaremecanismul de extract de apă de Fomitopsis Pinicola pe Apoptoza indusă de MPP de celule dopaminergice mezencefalice in vitro. Metode: Activitatea antioxidantă a ciupercilor a fost determinată prin metoda FRAP. Activitatea antiinflamatorie a ciupercilor a fost detectată prin metoda de eliberare NO indusă de LPS. Mesencephalic dopaminergiceNeuroniau fost etichetate de colorare TH pentru a observa supraviețuirea THirNeuroniRezultate: În testul de activitate anti-oxidant, Trolox echivalent capacitatea antioxidantă (TEAC) de extract de apă de Fomitonsis Pinicola a fost determinată a fi (165.80±7.13) umol Trolox/g extract de apă extracte de Fomitopsis Pimicola tratament(100,50,25,12.5ug/ml) a scăzut no formarea semnificativ. MPP* a indus condensarea semnificativă a cromatinei în nucleele dopaminergice mezenteeniceNeuronicu liza nucleară, potențialul membranei mitocondriale a scăzut remarcabil, iar producția de ROS a crescut semnificativ. Comparativ cu grupul de control MPPt, modificările morfologice ale nucleelor celulare după apoptoza au fost inversate de extractul de apă de Fomtitonsis Pinicola. Extractul de apă din tratamentul cu Fomitopsis Pinicola (50,25,12,5ug/ml) a crescut dramatic potențialul membranei mitocondriale relative în comparație cu controlul MPP. Comparativ cu controlul MPPt, extractul de apă din tratamentul cu Fomitonsis Pimicola (50, 25μg/ml) a scăzut semnificativ formarea relativă de SRO, respectiv Concluzii∶Extractul de apă de Fomitopsis Pinicola a arătat o semnificativăneuroprotectoareefect asupra celulelor dopaminergice mezencefalice induse de MPpt, Extractul de apă de Fomitopsis Pinicola a arătat activități antioxidante și antiinflamatorii. Mecanismulneuroprotectoareefectul extractului de apă de Fomitopsis Pimicola poate fi legat de inhibitor asupra stresului oxidativ mitocondrial.Cistancheglicozidele pot îmbunătăți nivelul de învățare și memorie al pacienților cu boala Alzheimer, pot reduce conținutul de malondialdehidă (MDA) în țesutul cerebral și pot crește glutation peroxidaza (GSH). -Px), superoxid dismutaza (superoxid dismutaza, SOD) activitate, reduce esteraza acetilcolinei (esteraza acetilcolinei, TChE) activitate, rata de apoptoza celulelor creierului, și de a reduce acumularea de calciu în țesutul cerebral.

Cuvinte cheie: Fomitopsis Pimicola, dopaminergiceNeuroniapoptoza, antioxidant, potențialul membranei mitocondriale, formarea ROS,Cistanche,Neuroprotectoare

Fond

Boala Parkinsoneste o boală neurodegenerativă la om, care afectează grav sănătatea a peste 6,5 milioane de oameni din întreaga lume. Prevalența persoanelor în vârstă de peste 65 de ani este de aproximativ 1 2% [1, 2]. Deși etiologia exactă și patogenezaBoala Parkinsonrămâne neclar, stresul oxidativ s-a dovedit a fi un factor cheie în degenerarea selectivă a dopaminergiceNeuroniîn striatumul nigrostriatal [3, 4]. Studiile au arătat că producția excesivă de specii reactive de oxigen (ROS) induce disfuncții mitocondriale, inclusiv scăderea potențialului membranei mitocondriale (△Ψm) și activitatea enzimelor complexe ale lanțului respirator I., precum și ADN-ul mitocondriilor anormale [5, 6]. În plus, sensibilitatea și selectivitatea căii nigrostriatale la stresul oxidativ poate duce, de asemenea, la deteriorarea ADN-ului dopaminergiceNeuronila pacienții cuBoala Parkinson[7].

Extract de glicozidă feniletanoidă înCistanchedeserticola poate îmbunătăți în mod semnificativ compoziția 1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridină, MPTP)-induse de PD model C57 șoareci caracteristici comportamentale, crește substantia nigra tirozină hidroxilază (tirozina hidroxilază, TH) până la și conținutul de DA în striatumul pacienților cuBoala Parkinson.În plus,cistancheextractul de fenil etanol glicozidă are un bun efect inhibitor asupra declinului viabilității celulelor granule cerebeloase la pacienții cuBoala Parkinsonși previne apoptoza celulară indusă de MPP+ a granulei cerebeloaseNeuroniprin inhibarea activării caspase-3 și caspase-8. Moartea, exercita efectul său anti-apoptotic.

Fomitopsis Pinicola este o ciupercă medicinală care aparține Polyporaceae și Pseudomonas. Are un gust plat, ușor amar și are efecte farmacologice, cum ar fi anti-oxidare, anti-bacterian, anti-tumoral și accesoriu imunitar [8, 9]. Studiile noastre anterioare au confirmat că extractele apoase de Fomitopsis Pinicola au un efect protector asupra apoptozei induse de MPP+a celulelor dopaminergice midbrain fetale, care pot crește semnificativ numărul de dopaminergiciNeuroniși lungimea axonală, și Creșterea activității enzimei complexe a lanțului respirator mitocondrial I[10].

În acest studiu, vom folosi metoda ferică de reducere a puterii antioxidante (FRAP)pentru a observa capacitatea antioxidantă a extractelor apoase de Fomitopsis Pinicola și pentru a observa efectul antiinflamator al eliberării de NO indusă de lipopolizaharidă (LPS) în microglia BV2. Efectele midbrain cultivate dopaminergiceNeuroniprivind morfologia nucleară, potențialul membranei mitocondriale și producția de SRO au fost observate in vitro, astfel încât să se dezvăluie mecanismul de protecție al endomicetelor pe dopaminergiceNeuroni.

Material

Animal

Șoarecii cu sarcină de 14 zile, OF1/SPF, de la Institutul austriac de genetică animală și veterinară de laborator, au experimentat cu animale experimentale în conformitate cu Directiva 86/609/UE a Comisiei Europene.

Probă de testare

Fomitopsis Pinicola a fost produs în Austria și a fost identificat de profesorul Wolf-Dieter Rausch ca footmitopsis Pinicola. După pulverizarea Fomitopsis Pinicola, extractul de apă a fost obținut prin extracția apei calde, iar conținutul brut de polizaharidă a fost de 8,95%.

linie celulară

Linia celulară de microgliom de șoarece BV2, de la Departamentul de Biochimie, Universitatea Veterinară din Viena, în mediu DMEM (Sigma) care conține 10% ser fetal bovin, 2% B27 (Gibco), 2% glutamină, 37 ° C5% co2 cultură.

mediu de cultură celulară

BM(mediu de bază)mediu la care mediu DMEM a fost suplimentat cu 10% ser fetal bovin,30 mM glucoză,2 mM glutamină,1% streptomicină și 0,5%amfotericină.

reactivi și instrumente principale

MPP+ este un produs sigma, puritatea ≥ 98%; anticorpii primari și secundari anti-tirozin hidroxilază (TH) sunt toate produsele american Vectastain.TPTZ(2.4.6-terpiridină triazină), FeCl3·6H2O, FeSO4·7H2O sunt produse ale soluției americane de uscare sigma-Aldrich.DAPI. Soluția de vopsire JC-1 și soluția de vopsire C-DCDHF-DA sunt toate produse ale sondelor moleculare Invitrogen. Concentrația inițială a soluției a fost de 1mg/ml,Img/ml și respectiv 1M. Microscop cu fluorescență, realizat de compania Nikon din Japonia, model TS-100-F. Spectrofotometru pentru Germania Pharmacia Biotech produse, modele pentru Novaspec II.I.

Cistanchepoate preveniBoala Parkinson

metodă

Determinarea capacității antioxidante a extractelor prin metoda FRAP

După prepararea a 30 ml de lichid de lucru FRAP (tampon de acetat de 300 mmol/l, soluție TPTZ de 10 mmol/l, 20 mmol/L soluții FeCly amestecate uniform la un raport de volum de 10:1:1),s-a adăugat lichid de lucru FRAP de 450 mu L cu concentrații diferite de extracte apoase de 60 ul de Fomitopsis Pinicola și 45 ul apă dublă evaporată. Amestecarea la 37°CC evită reacția luminii după 30 de minute, apoi determină valorile absorbanței sale la 593 nm. Capacitatea antioxidantă totală a fiecărui extract a fost cuantificată folosind Trolox ca standard. Pentru fiecare probă au fost efectuate trei teste paralele. Rezultatele au fost exprimate ca echivalent Trolox (TEAC)(mol TEAC/g) per gram de extract.

Nici un test de eliberare a fost folosit pentru a detecta efectul antiinflamator al extractului

Celulele logaritmice de fază BV2 au fost inoculate în plăci cu 48 de godeuri la concentrația de 1 x 10°celule/ml. După incubarea la 37 °C și 5% CO2, lipopolizaharida (LPS) a fost adăugată pentru stimulare, concentrația finală a fost de 1lug/ml. Apoi, s-au adăugat concentrații diferite ale extractului, iar celulele au fost cultivate la 37 °C sub 5% CO, timp de 48 h, după care a fost măsurată concentrația de NO,.. Înainte de proces. Reactivii griess A și B au fost scoși din frigider la 4 °CC și lăsați să echilibreze temperatura camerei timp de 30 de minute. Standardele de nitrit au fost diluate în serie (20,10, 5,2.1 și 0,5uM) pentru a produce curbe standard. Se adaugă 50 μL din etalonul diluat și supernatantul probei care urmează să fie testată (4 replici pentru fiecare concentrație), se adaugă la placa cu 96 de godeuri, apoi se adaugă 50

uL din soluția A, se incubează la temperatura camerei timp de 10 minute în întuneric și se adaugă 50 uL din soluția B. După incubare timp de 10 minute la temperatura camerei în întuneric, absorbanța a fost măsurată la 550 nm cu un cititor de microplate în decurs de 30 de minute, iar eliberarea de NO în supernatant a fost calculată în conformitate cu curba standard [11]. În același timp, 10 ul MTT(5 mg/ml în soluție PBS) a fost adăugat la fiecare godeu al plăcii celulare și cultivat la 37 °C timp de 5% CO, timp de 4 ore. După ce supernatantul a fost aruncat, 100 uL de DMSO a fost adăugat la fiecare godeu, iar absorbanța a fost măsurată la 570 nm după dizolvarea completă, pentru a observa rata de supraviețuire a celulei.

Cultura și identificarea celulelor dopaminergice midbrain primare și tratamentul medicamentos

Șoarecii gravide au fost sacrificați și transferați într-un vas Petri care conține tampon DPBS, embrionii de șoarece au fost disecați, midbraina a fost izolată, tăiată în bucăți mici și colectată în tampon DPBS care conține 2 ml de 0 1% tripsină și 2ml 0,02% DNase L Incubate timp de 7 minute în baie de apă de 37 °C °C și apoi se adaugă 2 ml de inhibitor de tripsină la o concentrație de 0,125 mg/ml, centrifugal țesutul la 100 x g timp de 4 min, și aruncați supernatantul. Apoi, s-a adăugat mediu DMEM care conține 0,02%DNază I, iar celulele separate au fost resuspendate în mediu de cultură celulară BM, însămânțate în plăci celulare tratate cu polilizină și cultivate la 37 °C,5% CO. În a 10-a zi de cultură, 10 μM MPP* a fost adăugat la celulele neuronului primar de cultură pentru tratament, iar apoi 50.25.12.5 ug/ml extract apos de Fomitopsis Pinicola a fost adăugat pentru tratament la 37 ° C,5% CO, a fost cultivat timp de 48 de ore. În a 12-a zi de cultură, unele celule au fost folosite pentru identificarea neuronilor dopaminergici, iar celulele au fost fixate cu 4% paraformaldehidă la 4 °C timp de 30 de minute și apoi permeabile timp de 30 de minute la temperatura camerei cu 0,4% Triton X-100. După clătirea cu tampon PBS timp de 3 ori, a fost blocată cu soluție de blocare a serului cal timp de 90 de minute, apoi s-a adăugat anticorpi primari anti-TH peste noapte, apoi s-a adăugat anticorp secundar biotinilat pentru temperatura camerei timp de 90 de minute și, în cele din urmă, a fost dezvoltat 3,3'-diaminobenzidină (DAB,5 mg/ml). Celulele pozitive pentru culoarea TH au fost observate la microscop ca neuroni dopaminergici.

Observarea morfologiei nucleare

MPP+ și celulele tratate cu medicamente au fost fixate cu 4% paraformaldehidă timp de 30 de minute, apoi rupte cu 0,4% Triton X-100 timp de 30 de minute și apoi adăugate cu soluție de pată DAPI la o concentrație finală de 1 ug/ml timp de 5 minute la temperatura camerei. Morfologia nucleului a fost observată la microscopul cu fluorescență. Lungimea de undă de excitație a fost de 340 nm, iar 4 câmpuri au fost selectate aleatoriu pentru fiecare godeu.

Detectarea potențialului membranei mitocondriale

MPP+ și celulele tratate cu medicamente au fost adăugate la JC-1 dve la o concentrație finală de 10 ug/ml și incubate la 37 °Cpentru 15 min. Modificarile intensitatii fluorescentei au fost observate prin microscopie fluorescenta la 488 nm, respectiv 568 nm lumina de excitatie. Modificarea potențialului membranei mitocondriale a fost măsurată prin raportul dintre intensitatea fluorescenței la 568 nm și intensitatea fluorescenței la 488 nm.

Testul de producție ROS

MPP+ și celulele tratate cu medicamente au fost adăugate la C-DCDHF-DA dve la o concentrație finală de 10 mM și după incubare la 37 °C timp de 30 de minute, soluția de cultură a fost eliminată, iar celulele au fost spălate de două ori cu un mediu DMEM incolor. Microscopia cu fluorescență a fost utilizată pentru a observa schimbarea intensității fluorescenței. Lungimea de undă de excitație a fost de 488 nm, iar 4 câmpuri de vedere au fost selectate aleatoriu pentru fiecare puț. Timpul de expunere a celulelor la lumina de excitație nu a fost mai mare de 5s.

Rezultatele

Capacitatea antioxidantă a Fomitopsis Pinicola

Fomitopsis Pinicola are un efect evident anti-oxidare, iar extractul său de apă are o capacitate antioxidantă de (165,80±7,13)extract de TEACh de μmol.

Efectul antiinflamator al Fomitopsis Pinicola

După ce celulele BV2 induse de LPS, eliberarea de NO a fost crescută semnificativ, ceea ce a fost semnificativ diferit de cel al grupului de control normal. După extractul apos de Fomitopsis Pinicola, eliberarea de NO a fost redusă semnificativ, dintre care 100,50, 25, a existat o diferență semnificativă între grupul de doză 12,5 ug/ml și grupul LPS (Fig. 1). După ce celulele BV2 induse de LPS, rata de supraviețuire a celulelor a fost semnificativ mai mică decât cea a grupului de control normal. După acțiunea extractului apos de Fomitopsis Pimicola, grupul de doze 100ug/ml a avut o reducere semnificativă a viabilității celulare și a existat o diferență semnificativă în comparație cu grupul LPS. Grupul de doze de 50,25,12,5 ug/ml nu a avut niciun efect semnificativ asupra viabilității celulare (figura 1, figura 2).

Identificarea neuronilor dopaminergici midbrain la șobolanii fetali

După colorarea specifică TH a neuronilor midbrain de șobolan fetal de cultură, neuronii dopaminergici au arătat o culoare galben-maronie clară, iar colorarea corpurilor celulare și a axonilor a fost vizibilă în mod clar, ceea ce a demonstrat că neuronii dopaminergici au fost cultivați cu succes (Figura 3).

Figura 1 Efectele extractelor de apă de Fomitopsis Pinicola asupra eliberării de NO în celulele BV2

indusă de LPS

Notă: comparativ cu grupul de control normal, **p< 0.01;="" compared="" with="" lps="" group,="" ##p="">< 0.01,="" #p=""><>

Figura 2 influența extractului de apă din Fomitopsis Pinicola asupra ratei de supraviețuire a celulelor BV2

Notă: comparativ cu grupul de control normal, **p< 0.01;="" compared="" with="" lps="" group,=""><>

Figura 3 TH - etichetate mezencefal DA neuron colorare

Efectul Fomitopsis Pinicola asupra morfologiei nucleare DAPI,4',6-diamidino-2-fenilendol, este o scufundare fluorescentă care penetrează membrana celulară și se leagă ciudat de ADN. Rezultatele acestui experiment au arătat că nucleele neuronilor dopaminergici din grupul de control normal au rămas aproape intacte, iar cromatina a fost uniformă. Grupul de control MPP+ a prezentat condensare semnificativă a cromatinei, liza membranei nucleare și liza nucleară. După acțiunea extractului apos de Fomitopsis Pinicola, morfologia nucleului a fost relativ intactă, iar caracteristicile apoptozei au fost reduse (Figura 4).

Efectul Fomitopsis Pinicola asupra potențialului membranei mitocondriale

După inducerea MPP+, potențialul membranei mitocondriale a neuronilor dopaminergici a scăzut semnificativ, ceea ce a fost semnificativ diferit de cel al grupului de control normal (P<0.01). after="" the="" action="" of="" the="" aqueous="" extract="" of="" fomitopsis="" pinicola,="" the="" mitochondrial="" membrane="" potential="" decreased="" after="" mpp+="" induction.="" there="" was="" a="" significant="" increase="" in="" mitochondrial="" membrane="" potential="" in="" the="" 50,="" 25,="" and="" 12.5ug/ml="" dose="" groups="" compared="" with="" the="" mpp+="" control="" group=""><0.01,><0.05)(figure>

Efectul Pseudomonas Sinensis asupra producției de ROS

După inducerea MPP +, producția de SRO a neuronilor dopaminergici a crescut semnificativ. care era semnificativ diferită de cea a grupului normal de control(P)<0.01). after="" the="" action="" of="" the="" aqueous="" extract="" of="" fomitopsis="" pinicola,="" the="" ros="" increased="" after="" mpp+induction.="" the="" reduction="" of="" ros="" production="" in="" the="" 50="" and="" 25="" ug/ml="" dose="" groups="" was="" significantly="" different="" from="" the="" mpp+control="" group=""><0.01)(figure 6,="" figure="">

Figura 4. Dapi fluorescență colorarea imagistica de neuroni DA în mezencefalice

Figura 5 Efectul extractului de apă de Fomitopsis Pinicola asupra MPP+ induse de mitocondrial

potențialul membranei neuronilor DA mezentaliliali

Notă: Comparativ cu grupul de control normal, **P< 0.01;="" compared="" with="" mpp+="" control="" group,="" #="" #="" p="">< 0.01,="" #="" p="">

0.05.

Figura 6. C-DCDHF-DA fluorescență colorarea da neuroni în mezencefalice

Figura 7 Efectele extractelor de apă din Fomitopsis Pinicola asupra MPP+ induse de MEzencefalie DA

neuron ROS de producție

Notă: în comparație cu grupul de control normal, **P< 0.01;="" compared="" with="" mpp+="" control="" group,="" #="" #="" p=""><>

Concluzie

Degenerarea neuronilor dopaminergici (neuronii DA) din midbrain se pierde, iar corpul Lewy în citoplasma neuronilor reziduali este principala caracteristică aBoala Parkinson.Simptomele clinice includ în principal tremor static, bradikinezie, hipermiotonia, instabilitate postură, et al. În prezent, tratamentulBoala Parkinsoneste încă dominată de terapia de substituție dopamina. Deși poate îmbunătăți simptomele pacienților, nu împiedică dezvoltarea bolii. Aplicarea pe termen lung va provoca multe reacții adverse [12], astfel încât studiul noilor abordări terapeutice este imperativ. Studiile au arătat că stresul oxidativ și nivelurile de dopamina oxidat sunt cauze importante de deteriorare selectivă a neuronilor dopaminergici [13], și unii antioxidanți naturali, cum ar fi quercetina, curcumina, polifenoli ceai, et al au fost confirmate a fi dopamina cauzate de agenți nervoase. Deteriorarea neuronală are efecte protectoare evidente [14-16], deci este promițătoare verificarea medicamentelor pentru tratamentulBoala Parkinsondin medicamentele tradiționale chineze cu efecte farmacologice antioxidante.

În acest studiu, FRAP a fost utilizat pentru a detecta capacitatea antioxidantă a extractelor apoase de Fomitopsis Trolox Pinicola, folosind (6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametilcroan)2-carboxilic acid)sa dovedit a avea efecte antioxidante semnificative. Efectul antiinflamator al extractelor apoase detectate este Pinicolawas Fomitopsis dby lipopolizaharid induse de BV2 microglia eliberare nu metodă, și nu a existat nici un efect semnificativ asupra viabilității celulare la concentrații sub 100 ug/ml, indicând faptul că a fost în celulele gliale au efecte antiinflamatorii semnificative și nu au nici un efect semnificativ asupra supraviețuirii celulelor.

Stresul oxidativ se referă la dezechilibrul dintre producerea și eliminarea radicalilor fără oxigen din organism. Este un eveniment precoce în procesul de degenerare neuronale-apoptoza. Studiile au arătat că țesutul cerebral este bogat în fosfolipide și acizi grași nesaturați, ambii fiind susceptibili la stres oxidativ. La pacienții cuBoala Parkinson, Malondialdehida, indicele de peroxidare a lipidelor, în striatum este semnificativ crescut, în timp ce concentrația de polinesaturate. acizi grași au scăzut semnificativ [17], conținutul de glutation (GSH) a scăzut, iar funcția enzimei complexe a lanțului respirator mitocondrial I a fost afectată[18,19]. MPP+ este un metabolit al agentului neurotoxic MPTP în organism, care poate genera radicali liberi în organism, inhibă funcția mitocondrială, distruge neuronii DA în substantia nigra și dezvoltă simptome deBoala Parkinsonîn modele animale. NU este, de asemenea, implicat în mecanismul de daune al MPP +. No excesiv difuzează în da neuroni, care poate nitrozare cu sulfhidril site-ul enzimei și inhibă mitocondrial lanț respirator complex enzima I activitate [20,21].

Rezultatele acestui studiu au arătat că, după MPP + induse de cultură primară DA neuroni, nucleul a arătat apoptoza evidentă, potențialul membranei mitocondriale a scăzut, și producția de ROS a crescut semnificativ, indicând faptul că MPP + poate induce apoptoza de da neuroni prin inhibarea stresului oxidativ mitocondrial. extractul apos de Fomitopsis Pinicola a poate îmbunătăți morfologia neuronilor dopaminergici după inducerea MPP +, crește potențialul membranei mitocondriale și reduce producția de SRO, indicând faptul că extractul de apă de Fomitopsis Pinicola inhibă deteriorarea neuronilor DA midbrain afectați de agenții nervoși, care pot fi legați de anti-oxidarea și inhibarea producției de NO și protejează neuronii prin inhibarea stresului oxidativ mitocondrial.

Referinţe

1. Khan AU, Akram M, Daniyal M, et al. Conștientizarea și cunoștințele actuale despre boala Parkinson: O tulburare neurodegenerativă. Int J Neurosci 2018, 8: 1-64.

2. Klingelhoefer L, Reichmann H. Boala Parkinson ca o tulburare multisistem. J Neural Transm (Viena) 2017, 124: 709-713.

3. Choi DH, Cristóvão AC, Guhathakurta S, et al. NADPH oxidaza 1-mediate stresul oxidativ duce la moartea neuronului dopaminergic în boala Parkinson. Antioxid Redox semnal 2012, 16: 1033-1045.

4. Asaithambi A, Ay M, Jin H, et al. Protein kinaza D1 (PKD1) fosforilare promovează supraviețuirea neuronale dopaminergice în timpul stresului oxidativ induse de 6-OHDA. PLoS One, 2014, 9: e96947.

5. Berndt N, Bulik S, Holzhütter HG. Modelarea cinetică a metabolismului energetic mitocondrial al celulelor neuronale: Impactul activităților reduse de α-ketoglutarat dehidrogenază asupra producției atp și generarea de specii reactive de oxigen. Int J Cell Biol 2012, 2012: 757594.

6. Yan MH, Wang X, Zhu X. Defecte mitocondriale și stresul oxidativ în boala Alzheimer și boala Parkinson. Gratuit Radic Biol Med 2013, 62: 90-101.

7. Guo C, Sun L, Chen X, Zhang D. Stresul oxidativ, leziuni mitocondriale, și boli neurodegenerative. Neural Regen Res 2013, 8: 2003-2014.

8. Hao L, Sheng Z, Lu J, et al. Caracterizarea și activitățile antioxidante ale polizaharidelor extracelulare și intracelulare din Fomitopsis Pinicola. Carbohydr Polym, 2016, 141: 54-59.

9. Shah F, Mali T, Lundell TK. Polyporales Brown Rot Specii Fomitopsis Pinicola: Profiluri de activitate enzimatică, producția de acid oxalic și Fe3 + reducerea secreției de metabolit.Appl Environ Microbiol, 2018, 84: e02662-17.

10. Guo SS, Wolf D. Studiu privind efectele neuroprotectoare ale extractului de apă de Fomitopsis Pinicola pe neuronii dopaminergici in vitro. Chin J Farmacovigil 2018, 15: 582-586.

11. Khaled Radad, Rudolf Moldzio, Wolf-Dieter Rausch. Toxicitate minociclina protejeaza neuronii dopaminergici împotriva Rotenone pe termen lung. Poate J Neurol Sci 2010, 37: 81-85.

12. Rizek P, Kumar N, Jog MS. O actualizare cu privire la diagnosticul și tratamentul bolii Parkinson. MAJ 2016, 188: 1157-1165.

13. Crotty GF, Ascherio A, Schwarzschild MA. Direcționarea urate pentru a reduce stresul oxidativ în boala Parkinson. Exp Neurol 2017, 298: 210-224.

14. Ay M, Luo J, Langley M, et al. Mecanisme moleculare care stau la baza efectelor protectoare ale quercetinei împotriva disfuncției mitocondriale și a neurodegenerării dopaminergice progresive în cultura celulară și a modelelor transgenice de șoarece MitoPark ale bolii Parkinson. J Neurochem 2017, 141: 766-782.

15. Wang MS, Boddapati S, Emadi S, et al. Curcumina reduce citotoxicitatea indusă de alfa-synuclein în modelul de celule al bolii Parkinson. BMC Neurosci 2010, 11: 57.

16. Weinreb O, Amit T, Mandel S, et al. Mecanismele moleculare neuroprotectoare ale (-)-epigallocatechin-3-gallate: un rezultat reflectorizant al proprietăților sale antioxidante, chelare de fier și neuritogenice. Gene Nutr 2009, 4: 283-296.

17. Dawson TM, Ko HS, Dawson VL. Modele animale genetice ale bolii Parkinson. Neuron 2010, 66:646-61.

18. Bodis-Wollner. Retinopatia în boala Parkinson. J Neural Transm (Viena) 2009, 116: 1493-1501.

19. Hisahara S, Shimohama S. Induse de toxine și modele genetice animale de boala Parkinson. Parkinson Dis. 2010, 2011: 951709.

20. Yang S, Liu T, Li S, et al. Analiza proteomică comparativă a creierelor șoarecilor care îmbătrânesc în mod natural. Neuroștiințe 2008, 154: 1107-1120.

21. Gautier CA, Corti O, Brice A. Disfuncții mitocondriale în boala Parkinson. Rev Neurol (Paris) 2014, 170:339-343.